荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒分析(2)
标志感染期的血清HbsAg HbeAg HbcAb 阳性的标本FQ-PCR定量平均拷贝数为7.4×108。标志恢复期或病毒携带状态的血清HbsAg HbeAb HbcAb均阳性的标本定量平均值为1.1×107,可见FQ-PCR可以反应乙肝患者的病情变化。
2例HbeAb HbcAb阳性的标本FQ-PCR检测有1例阳性(4.0×103),14例HbsAb阳性的标本检测到1例阳性(5.0×104)。这符合关于少数HbsAg阴性的患者体内病毒仍存在低水平复制的观点,[5]也证明FQ-PCR灵敏度高。
8例诊断为急性乙型肝炎的患者的血清标本FQ-PCR检测阳性为4例,阳性率为50%,定量平均拷贝值为1.6×106,这与文献报道的急性乙肝患者体内HBV-DNA含量显著低于慢性乙肝,乙肝后肝硬化和原发性肝癌患者含量的结果相符。诊断为慢性乙型病毒性肝炎,重度乙型病毒性肝炎,肝癌,肝硬化的患者的血清标本FQ-HBV检测HBV-DNA阳性率分别为73.3%,66.7%,100%,62.5%,都显著高于其他病人组(15.6%)(P<0.05)。3例重度乙肝患者检测到1例阴性,定量范围在0-1.4×105,量偏低,这可能与重度乙肝患者使用干扰素治疗有关。
本文对比了15例HbsAg HbeAb HbcAb阳性,FQ-PCR检测也阳性的患者与17例HbsAg HbeAb HbcAb阳性而FQ-PCR检测HBV-DNA阴性的患者的临床诊断,发现HBV-DNA组有13例被诊断为乙型肝炎,肝癌或肝硬化而HBV-DNA阴性组只有5例,存在明显差异(P<0.05)。这提示FQ-PCR能准确反应病毒的复制情况,为HbsAg HbeAb HbcAb患者提供了一个很有价值的诊断指标。
参考文献
[1] 程钢、何蕴韶、周新宇.荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒.中华医学检验杂志[J],1999,22(3):135-138
[2] Holland PM.Abramson RD.Watson R Detection of specific polymerase chain reaction product by utilizing the 5’to3’ exonuclease activity of the thermus aquaticus DNA polymerase.Proceedings of the National Academy of Sciences,1991,88:7276-7280
[3] 沈敏、张庆五、谈秋雯,等.PCR定量测定血清HBV-DNA的评估.胃肠病学[J],1999,4(1):55-56
[4] 赖宏芳、付晓野、董玉琳,等.荧光探针定量PCR检测HBVDNA[J].上海:上海医学检验学杂志,2000,15(1):1819
[5] Weinberger KM,Zoulek G,Bauer T,et al.A novel deletion mutant of hepatitis B virus surface antigen.J med Virol,1999,58:105
作者单位:516002 广东省惠州市第三人民医院检验科1
516002 广东省惠州市惠州区计划生育服务站2, 百拇医药(邱海山 严慧芳 潘俊辉 钟妙容)
2例HbeAb HbcAb阳性的标本FQ-PCR检测有1例阳性(4.0×103),14例HbsAb阳性的标本检测到1例阳性(5.0×104)。这符合关于少数HbsAg阴性的患者体内病毒仍存在低水平复制的观点,[5]也证明FQ-PCR灵敏度高。
8例诊断为急性乙型肝炎的患者的血清标本FQ-PCR检测阳性为4例,阳性率为50%,定量平均拷贝值为1.6×106,这与文献报道的急性乙肝患者体内HBV-DNA含量显著低于慢性乙肝,乙肝后肝硬化和原发性肝癌患者含量的结果相符。诊断为慢性乙型病毒性肝炎,重度乙型病毒性肝炎,肝癌,肝硬化的患者的血清标本FQ-HBV检测HBV-DNA阳性率分别为73.3%,66.7%,100%,62.5%,都显著高于其他病人组(15.6%)(P<0.05)。3例重度乙肝患者检测到1例阴性,定量范围在0-1.4×105,量偏低,这可能与重度乙肝患者使用干扰素治疗有关。
本文对比了15例HbsAg HbeAb HbcAb阳性,FQ-PCR检测也阳性的患者与17例HbsAg HbeAb HbcAb阳性而FQ-PCR检测HBV-DNA阴性的患者的临床诊断,发现HBV-DNA组有13例被诊断为乙型肝炎,肝癌或肝硬化而HBV-DNA阴性组只有5例,存在明显差异(P<0.05)。这提示FQ-PCR能准确反应病毒的复制情况,为HbsAg HbeAb HbcAb患者提供了一个很有价值的诊断指标。
参考文献
[1] 程钢、何蕴韶、周新宇.荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒.中华医学检验杂志[J],1999,22(3):135-138
[2] Holland PM.Abramson RD.Watson R Detection of specific polymerase chain reaction product by utilizing the 5’to3’ exonuclease activity of the thermus aquaticus DNA polymerase.Proceedings of the National Academy of Sciences,1991,88:7276-7280
[3] 沈敏、张庆五、谈秋雯,等.PCR定量测定血清HBV-DNA的评估.胃肠病学[J],1999,4(1):55-56
[4] 赖宏芳、付晓野、董玉琳,等.荧光探针定量PCR检测HBVDNA[J].上海:上海医学检验学杂志,2000,15(1):1819
[5] Weinberger KM,Zoulek G,Bauer T,et al.A novel deletion mutant of hepatitis B virus surface antigen.J med Virol,1999,58:105
作者单位:516002 广东省惠州市第三人民医院检验科1
516002 广东省惠州市惠州区计划生育服务站2, 百拇医药(邱海山 严慧芳 潘俊辉 钟妙容)