P27和nm23-H1在原发性乳腺癌组织中的表达及其意义(1)
[摘要]目的 探讨P27和nm23-H1在乳腺癌中的表达及其与临床病理因素的相关性。方法 应用免疫组织化学S-P法, 检测我院1998~2008年间临床资料完整的女性原发性乳腺癌105例和50例乳腺纤维腺瘤标本(阴性对照组)中P27和nm23～H1的表达,分析2种基因之间的相关性及与转移的关系。结果 P27的阳性表达率在乳腺癌组明显低于对照组(P<0.05)。nm23-H1的阳性表达率在阳性组和对照组间比较无显著性差异(P>0.05)。在乳腺癌中,nm23-H1的阳性率在各临床分期组间比较有显著性差异(P<0.01);P27和nm23-Hl的阳性率在各组织学分级组间比较有显著性差异(P<0.O1);nm23-H1和P27的阳性表达率在有无淋巴结转移组之间比较有显著性差异(P<0.05)。结论 联合检测乳腺癌组织中P27和nm23-H1的表达状况有助于判断预后。
[关键词]乳腺癌;P27;nm23-H1;预后;相关性
[Abstract]Objective To investigate the expression of P27 and nm23 and their correlation with clinical pathological factors in primary breast carcinoma. Methods S-P method of Immunohistochemiistry was applied to detect the expressions of P27 and nm23-H1 in 100 cases of primary breast cancer and 50 cases of breast fibroadenoma. The correlations between the two genes and their relations with metastasis and prognosis were analyzed, all the cases admitted in our hospital from 1998 to 2008. Results The positive expression rate of P27 in breast cancer wasstatistically lower than that in fibroadenoma.while nm23-H1 was also lower than in fibroadenoma and showed no significance(P>0.05). The positive expression rate of P27 and nm23-H1 were significantly associated with histological grading(P<0.01). The positive expression rate of P27 and nm23-H1 were significantly associated between between groups with and without lymph node metastasis(P<0.05).The expression of nm23-H1 was significantly associated with TNM stage(P<0.01). Conclusion It could help to judge patients’ prognosis by jointly detecting the expression rate of P27 and nm23-H1 in primary breast carcinoma.
, http://www.100md.com
[Key words]Carcinoma of breast;P27;nm23-H1;Prognosis; Correlation
乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一,占我国妇女恶性肿瘤第二位,其发病率有逐年上升及年轻化的趋势。本文应用免疫组化方法对原发性乳腺癌手术标本的石蜡包埋组织中进行P27和nm23-H1表达的检测,是为了进一步探讨癌基因蛋白及细胞增殖活性,观察癌组织中的表达以及之间存在的关系,推测转移率,指导对预后的估计,同时为临床提供治疗依据。
1. 资料与方法
1.1 临床资料
随机选取本院1998年1月～2008年12月间进行乳腺癌根治术患者105例,均为女性,年龄27～64岁,平均54.6岁。术前均经病理检查确诊,并有详细的随访和预后资料,所有病例在手术时无远处转移。随访期为4～39个月,其中64例随访5年或5年以上,目前存活49例(死亡15例)。临床分期IIa期15例,IIb期43例,Ⅲ-Ⅳ期47例;伴腋窝淋巴结转移阳性50例。病理组织学分类及组织学分级采用2003年乳腺肿瘤WHO组织学分类标准。病理组织学分级:I级46例,Ⅱ级42例,Ⅲ级17例。远处转移判定标准:经B超、CT、全身骨扫描诊断,有明确组织学诊断,有可测量标准。并以远处转移发生率作为反映预后的指标。所有标本均为10%中性福尔马林液固定,常规石蜡包埋、切片,厚度为4um,HE染色和免疫组化检测。乳腺癌全部病例术前均未接受放疗或化疗,术后进行常规化疗。随机选取1998年1月～2008年12月张掖市医院病理科保存的乳腺纤维腺瘤病理标本50例作为病理对照组,年龄27～54岁,平均34.6岁。
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1.2 试剂与方法
所用试剂P27和nm23-H1均由福州迈新生物技术有限公司提供。采取免疫组化S-P法,PBS冲洗、柠檬酸盐修复液(pH6.0)微波进行修复, DAB显色。用已知乳腺癌阳性片作阳性对照,用PBS代替一抗作阴性对照。免疫组化染色步骤;严格按试剂盒说明书进行。
1.3 结果判定
免疫组化染色评估根据肿瘤细胞染色程度及其染色反应的强度,采用高倍视野(40x10)随机取10个不同视野,每个视野计数100个肿瘤细胞中的阳性细胞(阳性细胞呈棕褐色细颗粒状)所占的比例,阴性(-):未见阳性表达或阳性细胞<5% ;弱阳性(+):阳性细胞数占6~25.9%; 中度阳性(++): 阳性细胞占26~50% ;强阳性(+++):阳性细胞≥51%以上;高倍镜下P27阳性信号为棕褐色或棕黄色颗粒主要定位于胞核/胞浆,阳性细胞在组织中分布不一,nm23阳性表达在在细胞浆和胞膜上。
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1.4 统计学方法
采用SPSS11.0统计软件对所得数据进行统计分析,各项参数值之间的比较运用X2检验,P27、nm23表达相关性分析采用Spearman等级相关分析。
2. 结果
2.1免疫组化检测结果
在乳腺癌组和乳腺纤维腺瘤组间比较:P27的表达有显著性差异(P0.05),见表1.
2.2 nm23,P27的表达与临床病理学特征的关系(表2)
, 百拇医药
3、讨论:
nm23最早是由美国国立癌症研究所steeg等分离出的一种被认为与肿瘤转移抑制有关的基因[1],其mRNA在低转移潜能的细胞系中的表达水平是高潜能细胞系的10倍。nm23位于19q21,有5个外显子及24个内含子构成,是一种公认的肿瘤转移表型抑制基因。研究表明[2],nm23基因的抑瘤作用具有组织特异性,在一些肿瘤,如乳腺癌、肝癌、恶性黑色素瘤、卵巢癌等,nm23的蛋白表达与肿瘤转移及临床预后不良呈负相关,正常乳腺上皮细胞nm23呈高表达,在乳腺癌进展过程中nm23表达水平逐渐降低。近年来的研究表明[3],nm23蛋白表达水平与乳腺癌患者腋淋巴结转移状况和癌细胞分化程度呈显著相关,对腋淋巴结转移及远处转移起抑制作用[4]。本研究显示nm23在乳腺癌组织中的阳性表达60例,阳性表达率为57.14%,其中高表达(++～+++)55例预后较好。nm23的表达随组织学分级升高而降低(P<0.05),在淋巴结无转移组明显高于有淋巴结转移组(P<0.05),并与术后生存年限呈正相关(P<0.05),提示nm23的高表达抑制了肿瘤转移而相对延长了患者的术后生存期。因此nm23基因可以作为判断转移的标志物,对估计乳腺癌的预后具有重要意义。, 百拇医药(张 掖 梁 芳 赵 新 陈德荣 罗 荣)
[关键词]乳腺癌;P27;nm23-H1;预后;相关性
[Abstract]Objective To investigate the expression of P27 and nm23 and their correlation with clinical pathological factors in primary breast carcinoma. Methods S-P method of Immunohistochemiistry was applied to detect the expressions of P27 and nm23-H1 in 100 cases of primary breast cancer and 50 cases of breast fibroadenoma. The correlations between the two genes and their relations with metastasis and prognosis were analyzed, all the cases admitted in our hospital from 1998 to 2008. Results The positive expression rate of P27 in breast cancer wasstatistically lower than that in fibroadenoma.while nm23-H1 was also lower than in fibroadenoma and showed no significance(P>0.05). The positive expression rate of P27 and nm23-H1 were significantly associated with histological grading(P<0.01). The positive expression rate of P27 and nm23-H1 were significantly associated between between groups with and without lymph node metastasis(P<0.05).The expression of nm23-H1 was significantly associated with TNM stage(P<0.01). Conclusion It could help to judge patients’ prognosis by jointly detecting the expression rate of P27 and nm23-H1 in primary breast carcinoma.
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[Key words]Carcinoma of breast;P27;nm23-H1;Prognosis; Correlation
乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一,占我国妇女恶性肿瘤第二位,其发病率有逐年上升及年轻化的趋势。本文应用免疫组化方法对原发性乳腺癌手术标本的石蜡包埋组织中进行P27和nm23-H1表达的检测,是为了进一步探讨癌基因蛋白及细胞增殖活性,观察癌组织中的表达以及之间存在的关系,推测转移率,指导对预后的估计,同时为临床提供治疗依据。
1. 资料与方法
1.1 临床资料
随机选取本院1998年1月～2008年12月间进行乳腺癌根治术患者105例,均为女性,年龄27～64岁,平均54.6岁。术前均经病理检查确诊,并有详细的随访和预后资料,所有病例在手术时无远处转移。随访期为4～39个月,其中64例随访5年或5年以上,目前存活49例(死亡15例)。临床分期IIa期15例,IIb期43例,Ⅲ-Ⅳ期47例;伴腋窝淋巴结转移阳性50例。病理组织学分类及组织学分级采用2003年乳腺肿瘤WHO组织学分类标准。病理组织学分级:I级46例,Ⅱ级42例,Ⅲ级17例。远处转移判定标准:经B超、CT、全身骨扫描诊断,有明确组织学诊断,有可测量标准。并以远处转移发生率作为反映预后的指标。所有标本均为10%中性福尔马林液固定,常规石蜡包埋、切片,厚度为4um,HE染色和免疫组化检测。乳腺癌全部病例术前均未接受放疗或化疗,术后进行常规化疗。随机选取1998年1月～2008年12月张掖市医院病理科保存的乳腺纤维腺瘤病理标本50例作为病理对照组,年龄27～54岁,平均34.6岁。
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1.2 试剂与方法
所用试剂P27和nm23-H1均由福州迈新生物技术有限公司提供。采取免疫组化S-P法,PBS冲洗、柠檬酸盐修复液(pH6.0)微波进行修复, DAB显色。用已知乳腺癌阳性片作阳性对照,用PBS代替一抗作阴性对照。免疫组化染色步骤;严格按试剂盒说明书进行。
1.3 结果判定
免疫组化染色评估根据肿瘤细胞染色程度及其染色反应的强度,采用高倍视野(40x10)随机取10个不同视野,每个视野计数100个肿瘤细胞中的阳性细胞(阳性细胞呈棕褐色细颗粒状)所占的比例,阴性(-):未见阳性表达或阳性细胞<5% ;弱阳性(+):阳性细胞数占6~25.9%; 中度阳性(++): 阳性细胞占26~50% ;强阳性(+++):阳性细胞≥51%以上;高倍镜下P27阳性信号为棕褐色或棕黄色颗粒主要定位于胞核/胞浆,阳性细胞在组织中分布不一,nm23阳性表达在在细胞浆和胞膜上。
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1.4 统计学方法
采用SPSS11.0统计软件对所得数据进行统计分析,各项参数值之间的比较运用X2检验,P27、nm23表达相关性分析采用Spearman等级相关分析。
2. 结果
2.1免疫组化检测结果
在乳腺癌组和乳腺纤维腺瘤组间比较:P27的表达有显著性差异(P
2.2 nm23,P27的表达与临床病理学特征的关系(表2)
, 百拇医药
3、讨论:
nm23最早是由美国国立癌症研究所steeg等分离出的一种被认为与肿瘤转移抑制有关的基因[1],其mRNA在低转移潜能的细胞系中的表达水平是高潜能细胞系的10倍。nm23位于19q21,有5个外显子及24个内含子构成,是一种公认的肿瘤转移表型抑制基因。研究表明[2],nm23基因的抑瘤作用具有组织特异性,在一些肿瘤,如乳腺癌、肝癌、恶性黑色素瘤、卵巢癌等,nm23的蛋白表达与肿瘤转移及临床预后不良呈负相关,正常乳腺上皮细胞nm23呈高表达,在乳腺癌进展过程中nm23表达水平逐渐降低。近年来的研究表明[3],nm23蛋白表达水平与乳腺癌患者腋淋巴结转移状况和癌细胞分化程度呈显著相关,对腋淋巴结转移及远处转移起抑制作用[4]。本研究显示nm23在乳腺癌组织中的阳性表达60例,阳性表达率为57.14%,其中高表达(++～+++)55例预后较好。nm23的表达随组织学分级升高而降低(P<0.05),在淋巴结无转移组明显高于有淋巴结转移组(P<0.05),并与术后生存年限呈正相关(P<0.05),提示nm23的高表达抑制了肿瘤转移而相对延长了患者的术后生存期。因此nm23基因可以作为判断转移的标志物,对估计乳腺癌的预后具有重要意义。, 百拇医药(张 掖 梁 芳 赵 新 陈德荣 罗 荣)