直肠癌细胞对化疗药物敏感性检测的相关性研究(1)
[摘要][目的] 通过对直肠癌的药物敏感性进行观察研究,为临床直肠癌患者化疗提供指导性依据。[方法]通过MTT方法,对76例人体直肠癌标本进行详细记录,并进行化疗药敏检测和分析。[结果]76例直肠癌标本组织的敏感性化疗药物分别为:阿霉素、羟基喜树碱、5一氟尿嘧啶、顺铂、丝裂霉素,与其它的临床性实践研究有一定的差异,同时,联合化疗药物相比单药在敏感性上有着显著的优势。[结论]试验结果有助于直肠癌化疗用药的治疗效果预测,并对不同个体的联合用药方案提供实践依据
[关键词]直肠癌药敏性检测 化疗药物检测
[Abstract][Objective]This is an empirical study which examines the chemosensitivity in clinical chemotherapy area, aiming at providing empirical analysis regarding clinical chemotherapy for rectum cancer. [Method]With the MTT method, 76 patients who suffered carcinoma of rectum were introduced into the empirical study. All the data and results was carefully recorded, in doing so the chemosensitivity analysis in clinical chemotherapy. [Result]According to the examination, 46 cases of carcinoma of rectum shows the different chemosenstivity with the order following: adriblastine, hydroxyeamptotheeine,5-Huorouraeil,cisplatin,mitomycin, which shows different results compared with the previous studies. Again, drug combination for carcinoma of rectum treatment shows an advantage effect compared with that of single medicine treatment. [Concision]The assay results provides the effects of different drug combination, in doing so a important indicator as well as the guidance for future carcinoma of rectum chemotherapy.
, 百拇医药
[Key words]Carcinoma of rectum; chemotherapy; chemosensitivity assay;
手术切除是目前治疗结肠癌的主要手段,但是作为最为常见的恶性肿瘤之一,直肠癌及易出现复发和转移。因此,医生大多根据经验使用化疗方案作为治疗结肠癌的重要手段。但是,由于肿瘤具备异质性的特点,传统的单药或者联合化疗方法很难满足不同患者的个体需求。为了研究直肠癌细胞对不同化疗药物的敏感性差异,提高术后化疗治疗效果,我们使用MTT方法对76例直肠癌细胞标本对不同单药和联合化疗药物的敏感性进行观察研究,并对试验结果进行统计分析,为以后的直肠癌临床尤其是不同个体的治疗方案提供实践依据,现将结果报告如下:
1 资料和方法
1.1 资料
本组病例来源于1/2009-12/2009本院的直肠患者,(手术前,手术均未使用化疗),其中男46例,女30例。平均年龄62岁。我们分析的病例学的类型如下:分化型腺癌31例,管状腺癌30例,腺鳞癌7例,小细胞癌5例,黏液性腺癌3例。
, 百拇医药
1.2 试验仪器设备
(1)CO2 细胞培养箱(shedon company); (2)倒置荧光相差显微镜(Olympus);(3)自动酶标仪(美国318-Microplate Reader 公司); (4)超净工作台(上海精密仪器厂); (5)恒温水浴箱(江苏太仓HWS-20);(6)微量振荡器(苏州安泰仪器厂); (7)低速离心机(北京医用离心机厂LDZ5-2);(8)96孔细胞培养板. 实验药物及试剂:(1)10 %小牛血清(杭州四季青); (2)MTT(美国FLUKA公司); (3)二甲亚砜(DMSO); (4)RPMI-1640(GIBCO); (5)抗癌药物:5-氟脲嘧啶(5-FLuorouracil,上海旭东海普药业)丝裂酶素(MMC)羟基喜树碱(HCPT)阿霉素(ADM)顺铂(CDDP).
1.3 试验方法
制备肿瘤但细胞悬液:在手术切除直肠后,我们在白直肠癌肿瘤生长旺盛的边缘处切除大约1.3cm的肿瘤组织,放入含有青霉素和链霉素的双抗液中。用常规的方法修剪除去肿瘤周围坏死组织及非肿瘤组织,剪碎肿瘤组织,并且用不锈钢滤网300目制作成肿瘤但细胞悬液,将其离心后弃上清液(1000rpm/m, 10min, 下同),用小牛血清液100ml/l调整细胞浓度为4*10(4)-5*10(5),以每孔200ul的体积,在培养板上以96孔种植。
, http://www.100md.com
在96孔培养板上,在第一列的平行的8个孔加入10%小牛血清液200ul进行实验试剂对照,试剂对实验的影响在在判断结果时排出;在第二列的平行的8个空中,加入200ul未加抗癌药物的肿瘤但细胞悬液,进行肿瘤细胞阴性对照,各种抗癌药物实验组,每中药物有3个平行孔,没孔加药量为20ul,终浓度为各抗癌药物浓度的0.1。在37摄氏度,100ml/二氧化碳及饱和湿度的细胞培养箱中放置培养板,培养68h,其后,取出离心,然后弃上清液,每孔加入不完全培养液200ul,5mg/ml,继续培养4h,取出,再离心上清液,每空加入DMSO 200UL,用微量振荡器振荡5MIN,在578nm波长自动梅标仪上进行读数和比色,测出每孔吸光度值。
药物对肿瘤细胞的抑制率是对其判断的重要标准2。细胞抑制率大于70%,我们称其为敏感,在50%-70%之间,我们称其为中度敏感,小于50%我们称其为不敏感。其中敏感率百分比为阳性病例于改组病例相除的百分率。
在进行瘤体手术切除后1年到1年半无复发征状的瘤体患者,我们将其视为临床用药有效。手术没有进行瘤体切除的患者,我们按照WHO统一标准进行评价3。其中CR(完全缓解)+PR(部分缓解)为有效。
1.4统计学处理
我们根据对每组药业的复孔D值进行测定,计算药物对癌细胞标本的平均抑制率(IR),以抑制率大于50%为敏感性,介于30%至50%定为中敏感,小于30%为不敏感4。并且采用国际通用的SAS统计软件对实验组进行方差分析和χ2检验。, 百拇医药(王成章 吴 颖 李 玲)
[关键词]直肠癌药敏性检测 化疗药物检测
[Abstract][Objective]This is an empirical study which examines the chemosensitivity in clinical chemotherapy area, aiming at providing empirical analysis regarding clinical chemotherapy for rectum cancer. [Method]With the MTT method, 76 patients who suffered carcinoma of rectum were introduced into the empirical study. All the data and results was carefully recorded, in doing so the chemosensitivity analysis in clinical chemotherapy. [Result]According to the examination, 46 cases of carcinoma of rectum shows the different chemosenstivity with the order following: adriblastine, hydroxyeamptotheeine,5-Huorouraeil,cisplatin,mitomycin, which shows different results compared with the previous studies. Again, drug combination for carcinoma of rectum treatment shows an advantage effect compared with that of single medicine treatment. [Concision]The assay results provides the effects of different drug combination, in doing so a important indicator as well as the guidance for future carcinoma of rectum chemotherapy.
, 百拇医药
[Key words]Carcinoma of rectum; chemotherapy; chemosensitivity assay;
手术切除是目前治疗结肠癌的主要手段,但是作为最为常见的恶性肿瘤之一,直肠癌及易出现复发和转移。因此,医生大多根据经验使用化疗方案作为治疗结肠癌的重要手段。但是,由于肿瘤具备异质性的特点,传统的单药或者联合化疗方法很难满足不同患者的个体需求。为了研究直肠癌细胞对不同化疗药物的敏感性差异,提高术后化疗治疗效果,我们使用MTT方法对76例直肠癌细胞标本对不同单药和联合化疗药物的敏感性进行观察研究,并对试验结果进行统计分析,为以后的直肠癌临床尤其是不同个体的治疗方案提供实践依据,现将结果报告如下:
1 资料和方法
1.1 资料
本组病例来源于1/2009-12/2009本院的直肠患者,(手术前,手术均未使用化疗),其中男46例,女30例。平均年龄62岁。我们分析的病例学的类型如下:分化型腺癌31例,管状腺癌30例,腺鳞癌7例,小细胞癌5例,黏液性腺癌3例。
, 百拇医药
1.2 试验仪器设备
(1)CO2 细胞培养箱(shedon company); (2)倒置荧光相差显微镜(Olympus);(3)自动酶标仪(美国318-Microplate Reader 公司); (4)超净工作台(上海精密仪器厂); (5)恒温水浴箱(江苏太仓HWS-20);(6)微量振荡器(苏州安泰仪器厂); (7)低速离心机(北京医用离心机厂LDZ5-2);(8)96孔细胞培养板. 实验药物及试剂:(1)10 %小牛血清(杭州四季青); (2)MTT(美国FLUKA公司); (3)二甲亚砜(DMSO); (4)RPMI-1640(GIBCO); (5)抗癌药物:5-氟脲嘧啶(5-FLuorouracil,上海旭东海普药业)丝裂酶素(MMC)羟基喜树碱(HCPT)阿霉素(ADM)顺铂(CDDP).
1.3 试验方法
制备肿瘤但细胞悬液:在手术切除直肠后,我们在白直肠癌肿瘤生长旺盛的边缘处切除大约1.3cm的肿瘤组织,放入含有青霉素和链霉素的双抗液中。用常规的方法修剪除去肿瘤周围坏死组织及非肿瘤组织,剪碎肿瘤组织,并且用不锈钢滤网300目制作成肿瘤但细胞悬液,将其离心后弃上清液(1000rpm/m, 10min, 下同),用小牛血清液100ml/l调整细胞浓度为4*10(4)-5*10(5),以每孔200ul的体积,在培养板上以96孔种植。
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在96孔培养板上,在第一列的平行的8个孔加入10%小牛血清液200ul进行实验试剂对照,试剂对实验的影响在在判断结果时排出;在第二列的平行的8个空中,加入200ul未加抗癌药物的肿瘤但细胞悬液,进行肿瘤细胞阴性对照,各种抗癌药物实验组,每中药物有3个平行孔,没孔加药量为20ul,终浓度为各抗癌药物浓度的0.1。在37摄氏度,100ml/二氧化碳及饱和湿度的细胞培养箱中放置培养板,培养68h,其后,取出离心,然后弃上清液,每孔加入不完全培养液200ul,5mg/ml,继续培养4h,取出,再离心上清液,每空加入DMSO 200UL,用微量振荡器振荡5MIN,在578nm波长自动梅标仪上进行读数和比色,测出每孔吸光度值。
药物对肿瘤细胞的抑制率是对其判断的重要标准2。细胞抑制率大于70%,我们称其为敏感,在50%-70%之间,我们称其为中度敏感,小于50%我们称其为不敏感。其中敏感率百分比为阳性病例于改组病例相除的百分率。
在进行瘤体手术切除后1年到1年半无复发征状的瘤体患者,我们将其视为临床用药有效。手术没有进行瘤体切除的患者,我们按照WHO统一标准进行评价3。其中CR(完全缓解)+PR(部分缓解)为有效。
1.4统计学处理
我们根据对每组药业的复孔D值进行测定,计算药物对癌细胞标本的平均抑制率(IR),以抑制率大于50%为敏感性,介于30%至50%定为中敏感,小于30%为不敏感4。并且采用国际通用的SAS统计软件对实验组进行方差分析和χ2检验。, 百拇医药(王成章 吴 颖 李 玲)