细胞培养基M199中几种维生素含量的测定方法
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【中图分类号】 R473.5 【文献标识码】A【文章编号】1672-3783(2011)05-0019-01
【摘要】本文建立了反相色谱法同时测定细胞培养基M199中维生素A、维生素E醋酸酯、维生素D2的含量的方法。采用Lichrospher C18，5μm，225×4mmid柱，可变波长UV检测器，甲醇为流动相，样品在10分钟内达到了基线分离。该方法简便、快速，结果可靠，可用于细胞培养基的质量控制。
【关键词】细胞培养基 维生素 高效液相色谱法
细胞培养基作为细胞工程重要的原材料，其品质的优劣直接影响到生物制品的质量，是生物制品企业非常重视的基础原料。而细胞培养基中含有氨基酸、维生素等必需的营养物质，它们是维持和促进细胞生长、增殖的主要因素。这些物质含量的多少、是否符合规定已成为衡量细胞培养基质量的重要指标。其中的某些维生素成分如维生素A、维生素E、维生素D2等对空气、光照和热极不稳定，且在培养基中的含量极少，是细胞培养基质量稳定性的重要影响因素。在细胞培养基M199中这三种维生素组分的含量在0.01μg/ml～0.14μg/ml之间，参考已报道的文献，脂溶性维生素的测定大都是含量较高的复合制品，而从含有61种成分的M199细胞培养基中提取这三种维生素并进行测定还未见报道[1～4]。由于这三种维生素的含量极低，在同一波长下难以同时测定三种组分，因此，我们采用可变波长UV检测器，利用多波长切换来分别测定VA、VD2和VE，以提高检测灵敏度，获得了良好的结果。
1实验部分
1.1 仪器和试剂：HP1050型高效液相色谱仪包括：HP 四元梯度泵、HP自动进样器、HP 可变波长紫外检测器、HP Pheonix Dos化学工作站；分析天平BS210S ......
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