【中图分类号】R155 【文献标识码】A 【文章编号】1672-3783(2011)07-0270-01

    【摘要】用大肠杆菌人工污染乳样品直接或8h增菌后提取DNA模板，以大肠杆菌丙氨酸消旋酶基因alr保守区设计引物，经过PCR扩增凝胶电泳检测，不增菌条件下全脂乳和脱脂乳的检出限为104CFU/ml，增菌后检出限为1CFU/ml。与国标鉴别培养法比较，PCR法时间缩短、灵敏度和准确度提高，该法更适宜乳品生产经营的快速实时检测。

    【关键词】大肠埃希氏菌(大肠杆菌)；聚合酶链式反应(PCR)

    1 材料与方法

    1.1 材料、试剂与仪器 :非致病性大肠杆菌ATCC 25922菌株中国医学科学院菌种保藏中心；肠出血性大肠杆菌EHEC O157:H7 EDL933菌株中国疾病预防控制中心；金黄色葡萄球菌、乳酸链球菌、枯草芽胞杆菌和四联球菌陕西科技大学生物化学实验室；全脂乳和脱脂乳样品市购。麦糠凯培养基(MacConKey broth)由国产分析纯试剂配制；日本产伊红美蓝琼脂培养基(eosin methyleneblue，EMB)；乳糖胆盐发酵管、乳糖发酵管、革兰氏染色液均按GB/T 4789.28—2003中4.7规定制作 ......