1.4.3 统计学分析

    实验组中目的基因相对对照组中的表达变化量Ratio=2-△△Ct 。△△Ct=实验组average(CtBMP-4-CtGAPDH)-对照组average(CtBMP-4-CtGAPDH)。采用统计学软件SPSS16.0对数据进行方差齐性检验，若方差齐，对两组采用独立配对t检验，若方差不齐，采用秩和检验，P<0.05为差异有统计学意义。

    1.5 WB方法检测BMP-4蛋白的表达

    1.5.1 方法

    血液采用未加抗凝剂处理的血清标本，采用双抗体夹心ELISA检测方法，严格按照试剂说明书进行操作，实验设3个复孔。向酶标板中分别加入浓度为0ng∕ml、0.2ng∕ml 、0.8ng∕ml、2ng∕ml、4ng∕ml、8ng∕ml的标准品25μl，血清样品25μl，编号并记录；再向酶标板中每孔加入25μlBiotin anti BMP-4，混匀30s，37℃30min；将板内反应混合液体甩净 ......