腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌检验的价值
【摘 要】目的 分析检验腹泻患者粪便中小肠结肠炎耶尔森菌的作用。方法 以2016.8-2017.5期间经检查确诊为腹泻的194例患者为本次观察对象，所有患者入院后取其新鲜粪便，分别行培养法、PT-PCR法对小肠结肠炎耶尔森菌进行检验，并根据检验方法的不同范围分为观察组(PT-PCR法)、对照组(培养法)，观察不同检验方式患者小肠结肠炎耶尔森菌检出情况。结果 观察组病菌检出阳性率为19.6%高于对照组阳性率10.3%，观察组用于病菌检验价值高，P<0.05。结论 临床对腹泻患者粪便中小肠结肠炎耶尔森菌检验使用PT-PCR法，具有较高的检出率。
【关键词】检验；耶尔森菌；粪便；腹泻
【中图分类号】R442.2 【文献标识码】A 【文章编号】1672-3783(2018)08-03--01
腹泻是临床最为常见的肠道疾病，病因较多如着凉、病菌感染、食物中毒等，患者主要表现为排便次数增加、粪便形态改变，但对于病菌感染致腹泻者，通常伴有恶心呕吐、腹痛、发热等症状。目前已知的腹泻致病菌大概上百种，小肠结肠炎耶尔森氏菌是临床常见感染性疾病，病菌可在肉类、蔬菜、乳制品等多种食物、环境、动物粪便中存在，传播途径多，可造成急性胃肠炎[1]。感染者临床除了常见的胃肠炎症状、发热等，部分患者还会出现败血症、阑尾炎、反应性关节炎，由于疾病多发于婴幼儿，若不及时治疗严重者可致患者死亡，因此如何提高临床对粪便中病菌检出率得到相关学者关注[2]。本文观察2016.8-2017.5期间194例腹泻患者分别以培养法、PT-PCR法进行检验粪便中病菌情况，旨在为今后病菌临床检测提供依据。
1 资料与方法
1.1 一般资料
以2016.8-2017.5期间经检查确诊为腹泻的194例患者为本次观察对象，所有患者入院时均出现不同程度每日排便次数增加(大于3次)及粪便形状改变情况，经检查确诊为腹泻，患者自愿参与。本次入院的194例患者，年龄区间8个月-75岁，平均(39.5±4.6)岁，男104例、女90例；病程1-6天，平均(3.7±0.5)天，排便次数3-7次，平均(4.8±0.3)次。
1.2 方法
患者于入院后24小时内取大便标本，置于洁净、干燥的容器内保存，注意避免标本中混有水、尿等杂质，后取0.5g粪便标本置入增菌液44.5ml0.9%氯化钠溶液中进行培养，培养环境设置温度16℃，培养时间18小时。
对照组：取培养后的标本5μg 接种于 CIN 平板上，并再次进行培养，条件温度25℃、时间24小时，后将标本菌株与标准菌株进行比较。
观察组：取培养后容器内混合物200 μg，行DNA 提取，PCR扩增，长度大约为 150 bp，反应体系包括：预混合液、探针、引物、模板、BSA，反应发生条件温度95℃，注意检验中设对照组。
1.3 观察指标
观察不同检验方式患者小肠结肠炎耶尔森菌检出情况。本次培养法阴性、阳性判断标准：以标准菌株作为阳性对照，若培养的菌株不具备标准菌的生化反应则为阴性，若出现与标准菌相同的反应则为阳性；PT-PCR法阴性、阳性判断标准：根据反应前后荧光差值进行判断，若样品经PCR扩增后未出现与预期相同大小的条带，则判定为阴性，若扩增后显现与预期相同大小条带则为阳性。
1.4 统计学分析
以SPSS19.0系统行数据统计学分析，计数、计量资料分别以n(%)、()表示，采用χ2或t检验，结果以P<0.05为有显著差异。
2 结果
不同检验方式病菌检出情况比较，观察组病菌检出阳性率为19.6%高于对照组阳性率10.3% ，观察组用于病菌检验价值高，P<0.05，见表1。
3 讨论
小肠结肠炎耶尔森菌是临床病情较重的传染性疾病，多发于秋冬季、婴幼儿，其症状与其他腹泻症状相似，难以鉴别易造成忽视，导致治疗时临床使用非敏感性抗菌药治疗，不仅使病情延误，还致使患者肠道外并发症(肝脾疾病、关节炎等)严重，引发不良预后情况[3]。因此如何有效诊断疾病得到临床关注，目前临床主要通过实验室方法(如培养法)对患者粪便进行检查来判断。
本次研究中對照组检验阳性率为10.3%，结果表明对粪便中耶尔森菌以培养法检验具有一定积极性意义。其采用人工方法使细菌生长繁殖，操作简便、流程少，可用肉眼观察结果进行判断。但观察组本次检验阳性率为19.6%高于对照组，提示PT-PCR法用于病菌检查检出率较高。分析原因培养法检测中需要严格执行无菌操作，一旦受外界污染便会导致错误结果，同时其检验耗时较长，可能会延误疾病治疗，引发不良后果，而PT-PCR法利用生化技术，通过提取RNA，以mRNA为模板、反转录为cDNA，并对其行PCR扩增，从而检测病菌基因表达[4]。此种检查方法能对样品进行定性、定量分析，临床检测特异性强、灵敏性高，且得到结果快速，用于耶尔森菌检查检出率高，便于临床准确掌握患者感染情况，从而及时给予合理治疗，促患者康复[5]。但PT-PCR法也存在一定缺点，其对操作者技术、检测仪器设备要求较高，且有可能得到非目的片段，导致检测中出现假阳性、假阴性，影响疾病诊断的准确度。
综上所述， 临床对腹泻患者粪便中小肠结肠炎耶尔森菌检验使用PT-PCR法，具有较高的检出率。
参考文献
周旭.腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌检验的价值结果分析[J].中国医药指南，2014，12(14)：102-103.
张景艳，荣幸，张永旭等.腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌检验的价值分析[J].中国卫生标准管理，2016，7(7)：161-162.
符倚川，赵艳，高运安等.两种方法检验腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌的结果比较[J].医学临床研究，2016，33(9)：1823-1824.
姜晓梅，李刚山，王意银等.小肠结肠炎耶尔森菌的分离鉴定及毒力基因检测[J].西南国防医药，2015，25(8)：844-846.
张爱华，刘瑜.腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森氏菌检验的价值分析[J].中外医学研究，2013，11(4)：72., 百拇医药(周方芳)
【关键词】检验；耶尔森菌；粪便；腹泻
【中图分类号】R442.2 【文献标识码】A 【文章编号】1672-3783(2018)08-03--01
腹泻是临床最为常见的肠道疾病，病因较多如着凉、病菌感染、食物中毒等，患者主要表现为排便次数增加、粪便形态改变，但对于病菌感染致腹泻者，通常伴有恶心呕吐、腹痛、发热等症状。目前已知的腹泻致病菌大概上百种，小肠结肠炎耶尔森氏菌是临床常见感染性疾病，病菌可在肉类、蔬菜、乳制品等多种食物、环境、动物粪便中存在，传播途径多，可造成急性胃肠炎[1]。感染者临床除了常见的胃肠炎症状、发热等，部分患者还会出现败血症、阑尾炎、反应性关节炎，由于疾病多发于婴幼儿，若不及时治疗严重者可致患者死亡，因此如何提高临床对粪便中病菌检出率得到相关学者关注[2]。本文观察2016.8-2017.5期间194例腹泻患者分别以培养法、PT-PCR法进行检验粪便中病菌情况，旨在为今后病菌临床检测提供依据。
1 资料与方法
1.1 一般资料
以2016.8-2017.5期间经检查确诊为腹泻的194例患者为本次观察对象，所有患者入院时均出现不同程度每日排便次数增加(大于3次)及粪便形状改变情况，经检查确诊为腹泻，患者自愿参与。本次入院的194例患者，年龄区间8个月-75岁，平均(39.5±4.6)岁，男104例、女90例；病程1-6天，平均(3.7±0.5)天，排便次数3-7次，平均(4.8±0.3)次。
1.2 方法
患者于入院后24小时内取大便标本，置于洁净、干燥的容器内保存，注意避免标本中混有水、尿等杂质，后取0.5g粪便标本置入增菌液44.5ml0.9%氯化钠溶液中进行培养，培养环境设置温度16℃，培养时间18小时。
对照组：取培养后的标本5μg 接种于 CIN 平板上，并再次进行培养，条件温度25℃、时间24小时，后将标本菌株与标准菌株进行比较。
观察组：取培养后容器内混合物200 μg，行DNA 提取，PCR扩增，长度大约为 150 bp，反应体系包括：预混合液、探针、引物、模板、BSA，反应发生条件温度95℃，注意检验中设对照组。
1.3 观察指标
观察不同检验方式患者小肠结肠炎耶尔森菌检出情况。本次培养法阴性、阳性判断标准：以标准菌株作为阳性对照，若培养的菌株不具备标准菌的生化反应则为阴性，若出现与标准菌相同的反应则为阳性；PT-PCR法阴性、阳性判断标准：根据反应前后荧光差值进行判断，若样品经PCR扩增后未出现与预期相同大小的条带，则判定为阴性，若扩增后显现与预期相同大小条带则为阳性。
1.4 统计学分析
以SPSS19.0系统行数据统计学分析，计数、计量资料分别以n(%)、()表示，采用χ2或t检验，结果以P<0.05为有显著差异。
2 结果
不同检验方式病菌检出情况比较，观察组病菌检出阳性率为19.6%高于对照组阳性率10.3% ，观察组用于病菌检验价值高，P<0.05，见表1。
3 讨论
小肠结肠炎耶尔森菌是临床病情较重的传染性疾病，多发于秋冬季、婴幼儿，其症状与其他腹泻症状相似，难以鉴别易造成忽视，导致治疗时临床使用非敏感性抗菌药治疗，不仅使病情延误，还致使患者肠道外并发症(肝脾疾病、关节炎等)严重，引发不良预后情况[3]。因此如何有效诊断疾病得到临床关注，目前临床主要通过实验室方法(如培养法)对患者粪便进行检查来判断。
本次研究中對照组检验阳性率为10.3%，结果表明对粪便中耶尔森菌以培养法检验具有一定积极性意义。其采用人工方法使细菌生长繁殖，操作简便、流程少，可用肉眼观察结果进行判断。但观察组本次检验阳性率为19.6%高于对照组，提示PT-PCR法用于病菌检查检出率较高。分析原因培养法检测中需要严格执行无菌操作，一旦受外界污染便会导致错误结果，同时其检验耗时较长，可能会延误疾病治疗，引发不良后果，而PT-PCR法利用生化技术，通过提取RNA，以mRNA为模板、反转录为cDNA，并对其行PCR扩增，从而检测病菌基因表达[4]。此种检查方法能对样品进行定性、定量分析，临床检测特异性强、灵敏性高，且得到结果快速，用于耶尔森菌检查检出率高，便于临床准确掌握患者感染情况，从而及时给予合理治疗，促患者康复[5]。但PT-PCR法也存在一定缺点，其对操作者技术、检测仪器设备要求较高，且有可能得到非目的片段，导致检测中出现假阳性、假阴性，影响疾病诊断的准确度。
综上所述， 临床对腹泻患者粪便中小肠结肠炎耶尔森菌检验使用PT-PCR法，具有较高的检出率。
参考文献
周旭.腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌检验的价值结果分析[J].中国医药指南，2014，12(14)：102-103.
张景艳，荣幸，张永旭等.腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌检验的价值分析[J].中国卫生标准管理，2016，7(7)：161-162.
符倚川，赵艳，高运安等.两种方法检验腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌的结果比较[J].医学临床研究，2016，33(9)：1823-1824.
姜晓梅，李刚山，王意银等.小肠结肠炎耶尔森菌的分离鉴定及毒力基因检测[J].西南国防医药，2015，25(8)：844-846.
张爱华，刘瑜.腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森氏菌检验的价值分析[J].中外医学研究，2013，11(4)：72., 百拇医药(周方芳)