肾宁胶囊的制备及质量控制
[摘要]目的：研究肾宁胶囊的制备及质量控制方法。方法：确定制备工艺，对部分药材进行薄层色谱鉴别。结果：制备工艺可靠，建立了对处方中主药黄芪、丹参、熟地、山茱萸的薄层色谱鉴别方法。结论：鉴别方法快速，重现性好，稳定可靠，可作为该制剂质量控制的定性指标。
[关键词]肾宁胶囊；医院制剂；质量控制；薄层色谱
肾宁胶囊是在多年临床经验基础上，总结出来的治疗慢性肾病经验处方，由19种中药材精制而成的纯中药制剂。本研究确定了处方中主药黄芪、丹参、熟地、山茱萸的薄层色谱定性鉴别方法，为控制本制剂质量并制定更严格的质量控制标准奠定了基础。
1处方及制备
1.1处方黄芪300g、太子参200g、茯苓200g、白术150g、山药200g、枸杞子150g、熟地黄200g、白芍150g、山茱萸200g、薏苡仁100g、丹参300g、川芎150g、红花100g、益母草250g、白茅根200g、泽兰150g、白花蛇舌草300g、桑寄生150g、甘草100g。试药：肾宁胶囊3批(本院制剂中心提供，批号20101113为供试品①，批号20101206为供试品②，批号20110112为供试品③)
, 百拇医药
1.2制法以上19味，加水煎煮三次，每次1小时，煎液滤过，70℃减压浓缩至稠膏，加淀粉适量，干燥，粉碎成细粉，装入胶囊，制成1000粒。每粒装0.4g，含生药2克。
2质量控制
2.1性状
本品为胶囊剂，内容物为浅褐色粉末；气特异，味酸苦。
2.2黄芪鉴别
2.2.1供试品溶液的制备：取本品20粒，除去胶囊，加70%乙醇60ml，加热回流90分钟。滤过，滤液蒸干。加甲醇40ml，超声处理30分钟，滤过，滤液水浴蒸干，加水40ml，用石油醚(60-90℃)萃取两次，每次20ml，弃去醚液，水液挥发至无醚味，加水饱和正丁醇振摇提取两次，每次20ml，合并提取液，加氨试液振摇提取两次，每次20ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解使成1ml，作为供试品溶液。
, 百拇医药
2.2.2对照品溶液的制备：取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液
2.2.3阴性对照品溶液的制备：按处方比例制成不含黄芪的本品，照供试品溶液制备方法制备阴性对照溶液。
2.2.4薄层色谱法实验：吸取上述两种溶液各10ul，分别点于同一含羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(20：40：22：10)，10℃以下放置后的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃加热数分钟，至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
2.3丹参鉴别
2.3.1供试品溶液的制备：取本品20粒，除去胶囊，加二氯甲烷30ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加二氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液。
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2.3.2对照品溶液的制备：取丹参酮ⅡA对照品，加二氯甲烷制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
2.3.3阴性对照品溶液的制备：按处方比例制成不含丹参的本品，照供试品溶液制备方法制备阴性对照溶液。
2.3.4薄层色谱法实验：吸取供试品溶液20ul，对照品溶液5ul，分别点于同一含羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯(19：1)——为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的红色斑点。
2.4熟地鉴别
2.4.1供试品溶液的制备：取本品15粒，除去胶囊，加甲醇30ml，温浸，振摇1小时，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液。
2.4.2对照品溶液的制备：取5-羟甲基糠醛对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
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2.4.3阴性对照品溶液的制备：按处方比例制成不含熟地的本品，照供试品溶液制备方法制备阴性对照溶液。
2.4.4薄层色谱法实验：吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一含羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶GF254薄层板上，以石油醚(60-90℃)-醋酸乙酯(1：1)为——展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
2.5山茱萸鉴别
2.5.1供试品溶液的制备：取本品20粒，除去胶囊，加乙醚30ml，加热回流1小时，滤过，滤液低温挥去乙醚，残渣加丙酮1ml使溶解，作为供试品溶液。
2.5.2对照品溶液的制备：取熊果酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
, http://www.100md.com 2.5.3阴性对照品溶液的制备：按处方比例制成不含熟地的本品，照供试品溶液制备方法制备阴性对照溶液。
2.5.4薄层色谱法实验：吸取供试品溶液20ul，对照品溶液5ul，分别点于同一含羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-醋酸乙酯-冰醋酸(12：4：0.5)——为展开剂，展开，取出，晾干，喷以30%硫酸乙醇溶液，105℃加热数分钟，至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点。
2.6检查：应符合《中国药典》2010年版一部附录胶囊剂项下各项规定。
3讨论
肾脏疾病，病情复杂，特别是慢性肾病，其病程迁延，但其病机多以脾肾两虚，水湿停留，淤血内阻为多见。方中黄芪、太子参、云苓、焦白术，怀山药、薏米健脾益气，兼可利湿；白芍、枸杞子、熟地、山萸肉、桑寄生补肾益气；红花、川芎、丹参均能活血行瘀，气为血帅，气行则血行，故须活血化瘀药与益气药相伍，以助活血化瘀之力。益母草、泽兰、白花蛇舌草，既可活血祛瘀，又可利水，加用白茅根以增强利水消肿的作用。全方共取补肾健脾，益气利水，活血化瘀之效。
实验表明，3批供试品溶液均与对照品溶液在色谱相应位置显相同颜色斑点，而阴性对照溶液不显相应主斑点，检出成分不受处方中其他群药的干扰，该鉴别专属性强，重现性好，稳定，可作为该制剂质量控制的定性检验方法。
参考文献：
[1]刘久红，刘媛.润通1号口服液的制备及临床应用[J].中华临床医药学杂志，2006；3(47)：137.
[2]孙翠华，沈丹，张鹰.通腑合剂的制备及质量控制[J].中国医院药学杂志，2006；26(9)：1154-1155., 百拇医药(张小东)
[关键词]肾宁胶囊；医院制剂；质量控制；薄层色谱
肾宁胶囊是在多年临床经验基础上，总结出来的治疗慢性肾病经验处方，由19种中药材精制而成的纯中药制剂。本研究确定了处方中主药黄芪、丹参、熟地、山茱萸的薄层色谱定性鉴别方法，为控制本制剂质量并制定更严格的质量控制标准奠定了基础。
1处方及制备
1.1处方黄芪300g、太子参200g、茯苓200g、白术150g、山药200g、枸杞子150g、熟地黄200g、白芍150g、山茱萸200g、薏苡仁100g、丹参300g、川芎150g、红花100g、益母草250g、白茅根200g、泽兰150g、白花蛇舌草300g、桑寄生150g、甘草100g。试药：肾宁胶囊3批(本院制剂中心提供，批号20101113为供试品①，批号20101206为供试品②，批号20110112为供试品③)
, 百拇医药
1.2制法以上19味，加水煎煮三次，每次1小时，煎液滤过，70℃减压浓缩至稠膏，加淀粉适量，干燥，粉碎成细粉，装入胶囊，制成1000粒。每粒装0.4g，含生药2克。
2质量控制
2.1性状
本品为胶囊剂，内容物为浅褐色粉末；气特异，味酸苦。
2.2黄芪鉴别
2.2.1供试品溶液的制备：取本品20粒，除去胶囊，加70%乙醇60ml，加热回流90分钟。滤过，滤液蒸干。加甲醇40ml，超声处理30分钟，滤过，滤液水浴蒸干，加水40ml，用石油醚(60-90℃)萃取两次，每次20ml，弃去醚液，水液挥发至无醚味，加水饱和正丁醇振摇提取两次，每次20ml，合并提取液，加氨试液振摇提取两次，每次20ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解使成1ml，作为供试品溶液。
, 百拇医药
2.2.2对照品溶液的制备：取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液
2.2.3阴性对照品溶液的制备：按处方比例制成不含黄芪的本品，照供试品溶液制备方法制备阴性对照溶液。
2.2.4薄层色谱法实验：吸取上述两种溶液各10ul，分别点于同一含羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(20：40：22：10)，10℃以下放置后的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃加热数分钟，至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
2.3丹参鉴别
2.3.1供试品溶液的制备：取本品20粒，除去胶囊，加二氯甲烷30ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加二氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液。
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2.3.2对照品溶液的制备：取丹参酮ⅡA对照品，加二氯甲烷制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
2.3.3阴性对照品溶液的制备：按处方比例制成不含丹参的本品，照供试品溶液制备方法制备阴性对照溶液。
2.3.4薄层色谱法实验：吸取供试品溶液20ul，对照品溶液5ul，分别点于同一含羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯(19：1)——为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的红色斑点。
2.4熟地鉴别
2.4.1供试品溶液的制备：取本品15粒，除去胶囊，加甲醇30ml，温浸，振摇1小时，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液。
2.4.2对照品溶液的制备：取5-羟甲基糠醛对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
, http://www.100md.com
2.4.3阴性对照品溶液的制备：按处方比例制成不含熟地的本品，照供试品溶液制备方法制备阴性对照溶液。
2.4.4薄层色谱法实验：吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一含羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶GF254薄层板上，以石油醚(60-90℃)-醋酸乙酯(1：1)为——展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
2.5山茱萸鉴别
2.5.1供试品溶液的制备：取本品20粒，除去胶囊，加乙醚30ml，加热回流1小时，滤过，滤液低温挥去乙醚，残渣加丙酮1ml使溶解，作为供试品溶液。
2.5.2对照品溶液的制备：取熊果酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
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2.5.4薄层色谱法实验：吸取供试品溶液20ul，对照品溶液5ul，分别点于同一含羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-醋酸乙酯-冰醋酸(12：4：0.5)——为展开剂，展开，取出，晾干，喷以30%硫酸乙醇溶液，105℃加热数分钟，至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点。
2.6检查：应符合《中国药典》2010年版一部附录胶囊剂项下各项规定。
3讨论
肾脏疾病，病情复杂，特别是慢性肾病，其病程迁延，但其病机多以脾肾两虚，水湿停留，淤血内阻为多见。方中黄芪、太子参、云苓、焦白术，怀山药、薏米健脾益气，兼可利湿；白芍、枸杞子、熟地、山萸肉、桑寄生补肾益气；红花、川芎、丹参均能活血行瘀，气为血帅，气行则血行，故须活血化瘀药与益气药相伍，以助活血化瘀之力。益母草、泽兰、白花蛇舌草，既可活血祛瘀，又可利水，加用白茅根以增强利水消肿的作用。全方共取补肾健脾，益气利水，活血化瘀之效。
实验表明，3批供试品溶液均与对照品溶液在色谱相应位置显相同颜色斑点，而阴性对照溶液不显相应主斑点，检出成分不受处方中其他群药的干扰，该鉴别专属性强，重现性好，稳定，可作为该制剂质量控制的定性检验方法。
参考文献：
[1]刘久红，刘媛.润通1号口服液的制备及临床应用[J].中华临床医药学杂志，2006；3(47)：137.
[2]孙翠华，沈丹，张鹰.通腑合剂的制备及质量控制[J].中国医院药学杂志，2006；26(9)：1154-1155., 百拇医药(张小东)