2.5 免疫组化测各组细胞eNOS的蛋白表达

    将细胞接种于24孔板中，各组加药处理后，4%多聚甲醛固定20 min，PBS洗3遍。进行10%SDS-PAGE电泳分离，转膜后，PBS洗3遍。在加3%H2O2灭活内源性酶15 min，PBS洗3遍，滴入封闭液，室温20 min后吸出，各组分别加入双抗。DAB显色，倒置显微镜下观察拍照。采用医学图像分析系统测定平均光密度值每组测6个不同视野取均值作为该组测定值。

    2.6 统计方法

    采用SPSS 17.0统计学软件分析数据，进行单因素方差分析，两两比较，P<0.05为差异有统计学意义。

    3 实验结果

    3.1 各组EA.hy926细胞eNOS mRNA的表达

    RT-PCR结果，与正常组相比，模型组細胞eNOS mRNA表达显著减少。槲皮素组、二甲双胍组与模型组相比eNOS mRNA 表达显著增加。药物组间差异无统计学意义(P>0.05)。见图1、图2及表1。

    3.2 免疫组化实验结果

    正常对照组可见大量的eNOS 阳性表达细胞 ......