黑质过表达α-突触核蛋白对小鼠运动行为的影响(2)
1 材料与方法1.1 实验材料
SPF级8周龄雄性C57BL/6J小鼠40只,购于北京维通利华实验技术有限公司,饲养于清洁的小鼠房内,每笼4只,保证室温(21±2)℃、湿度(50±5)%、12/12 h昼夜循环光照,小鼠可自由饮水、取食。AAV由和元生物技术(上海)股份有限公司生产,实验组病毒为AAV2/9-α-syn,滴度为1.65×1016V.G./L,对照组病毒为AAV2/9-EGFP,滴度为9.95×1015V.G./L,经公司检测均可以正常表达。α-syn抗体为美国CST公司产品,β-actin抗体为中国博奥森公司产品。
1.2 动物分组及处理
待小鼠适应环境1周后,将其随机平均分为2组。利用瑞沃德公司的呼吸麻醉机将其深度麻醉后,迅速取出固定在小鼠立体定位仪上,同时用异氟烷给予持续麻醉。将小鼠用耳杆适配器固定好,使其头部平整,耳杆左右读数相同,暴露出小鼠颅骨,参照第2版小鼠脑立体定位图谱,定位并读出前囟坐标,在三维推动器的引导下至SN区,其坐标为前囟后-3.1 mm、旁开±1.4 mm、深度-4.4 mm[17]。两组小鼠均采用微量注射泵在两侧SN注射200 nL病毒 ......
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