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编号:13565258
雌二醇对原代小胶质细胞铁相关蛋白表达的影响(2)
http://www.100md.com 2019年2月1日 《青岛大学学报(医学版)》 20191
     1 材料与方法

    1.1 小胶质细胞的原代培养与分离纯化

    1.1.1小胶质细胞的原代培养 出生24 h内的Wistar大鼠(由青岛市药检所动物中心提供)用体积分数0.75乙醇消毒5 min,在超净工作台(苏州净化,江苏)上开颅取脑,快速剥除脑膜及血管,取腹侧中脑组织置于装有适量DMEM/F12培养基(Hyclone公司,美国)的培养皿中,用移液枪和10 mL一次性注射器反复吹打均匀至无大组织颗粒,移至50 mL大离心管中并用低速离心机(中科中佳科学仪器有限公司,安徽)以1 000 r/min离心5 min,弃上清,在沉淀物中加入含有体积分数0.10胎牛血清(Gibco公司,美国)、10 g/L青/链霉素(Solarbio公司,美国)的培养液,重新吹打均匀接种于250 cm2培养瓶中,在37 ℃、含体积分数0.05 CO2的培养箱(Thermo Electron Corporation公司,美國)中倒置培养30 min,随后正置继续培养 ......
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