1资料与方法

    1.1一般资料

    收集2017年6月—2018年4月在青岛大学附属医院行腰椎手术病人的椎间盘髓核组织50例，其中15例取自椎体爆裂骨折的青少年髓核组织(对照组)，35例取自腰椎间盘退变病人髓核组织(实验组)。根据SPENGLER[19]的方法及术前MRI将实验组分为突出组(12例)、脱出组(13例)、游离组(10例)。纳入标准：①入院后经MRI检查明确诊断;②符合腰椎间盘突出症的诊断标准;③病人或其家属自愿签署知情同意书。排除标准：①哺乳期、妊娠期妇女;②合并感染病人;③合并肿瘤病人;④合并后纵韧带骨化、黄韧带骨化病人;⑤合并免疫性疾病或其他全身疾病的病人。本文研究经青岛大学附属医院伦理学委员会审批通过。

    1.2主要材料

    聚氰基丙烯酸正丁酯(BCA)购自北京索莱宝科技有限公司;十二烷基磺酸钠`-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS`-PAGE)蛋白上样缓冲液(5×)购自上海碧云天生物技术有限公司;HSPA8一抗购自Abcam公司;内参一抗、二抗购自武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司;免疫组化试剂盒购自上海麦约尔生物科技有限公司。

    1.3研究方法

    1.3.1Western`-blot方法检测HSPA8表达剪取0.1 g椎间盘组织置于研磨碗中，再加入500 μL的RIPA裂解液提取蛋白。4 ℃条件下12 000 r/min离心10 min，吸取上层透亮液体加入上样缓冲液中。BCA法测定蛋白浓度。从-20 ℃冰箱中取出样品 ......