siRNA沉默PLK1基因对骨肉瘤细胞生物学特性影响(2)
1材料与方法1.1主要材料
人骨肉瘤MG`-63细胞系购自美国ATCC公司,RPMI`-1640培养液、胎牛血清购自美国Gibco公司,Trizol总RNA提取试剂盒购自北京百泰克生物技术公司,Lipofectamine2000转染试剂购自北京方程佰金科技公司,逆转录和PCR试剂盒购自日本TaKaRa公司,PLK1及内参引物由上海生工生物公司设计合成,siRNA`-PLK1、siRNA`-对照序列由上海吉玛制药技术公司设计合成,Transwell小室购自美国Millipore公司,兔抗人PLK1多克隆抗体购自美国Calbiochem公司,Annexin V`-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒、流式细胞仪购自美国BD公司,凝胶电泳分析系统购自美国Bio`-rad公司。
1.2实验方法
1.2.1细胞培养及分组MG`-63细胞加含体积分数0.10胎牛血清的RPMI`-1640培养液,置于含体积分数0.05 CO2、37 ℃恒温培养箱中培养 ......
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