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编号:13547501
壳聚糖改性对玻璃离子水门汀细胞毒性的影响(2)
http://www.100md.com 2019年6月1日 《青岛大学学报(医学版)》 20193
     1.2.4HGFs来源鉴定细胞传至第3代时,采用2.5 g/L胰蛋白酶进行消化,制备细胞爬片。使用40 g/L甲醛溶液固定后,常规免疫荧光法进行抗波形丝蛋白和抗角蛋白的荧光染色,并于倒置荧光显微镜下观察。

    1.2.5材料浸提液制备及pH值检测按照1.2.1的方法制备GIC(A组)、含质量分数0.01、0.02、0.04 CS的CS-GIC样本(B组、C组、D组),紫外线照射消毒后,放入无菌的完全培养基(含体积分数0.10胎牛血清、体积分数0.01双抗的α-MEM培养基)中,按照ISO推荐的浓度 [5]在37 ℃下浸提24 h,得到浸提原液,并用完全培养基对浸提原液进行等体积比稀释,最终得到体积分数分别为1.00、0.50、0.25、0.13的浸提液。使用pH值检测仪对无菌的浸提液进行pH值检测。以完全培养基为空白对照(对照组)。

    1.2.6HGFs毒性检测取第5代生长状态良好的HGFs,制备密度7×107/L的细胞悬液。向96孔细胞培养板每孔加入100 μL的细胞悬液,以完全培养基为空白对照组 ......
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