1.3检测指标及方法

    将组织切片置于烘片机中烘烤1 h，缓冲液冲洗3次，微波抗原修复20 min，加入30 g/L过氧化物酶1孵育10 min，微波加热修复2 min，分别滴加一抗HIF-1α、MMP-2及GLUT-1(滴度分别为1∶200，1∶75和1∶150)，37 ℃水浴1 h，加入通用型二抗PV-6001，置37 ℃恒温箱45 min。 阳性对照采用自身对照，阴性对照采用PBS缓冲液代替一抗。光镜下观察染色情况。

    1.4结果判断

    HIF-1α和GLUT-1染色结果判定：随机取切片四角及中央10个高倍视野进行观察。细胞染色强度评分：3分，棕褐色染色;2分，棕黄色染色;1分，浅黄色染色;0分，细胞无显色。再对阳性细胞百分比评分：<30%为1分;30%～70%为2分，>70为3分。根据染色强度和阳性细胞百分比评分相乘得分评定结果，<1分为阴性表达(-)，≥1分为阳性表达(+)。MMP-2染色结果评定：阳性细胞百分数<10%为阴性(-)，≥10%为阳性(+)。

    1.5统计学方法

    采用SPSS 24.0 软件进行统计学处理 ......