miR-92a对宫颈癌细胞增殖凋亡影响及其机制(2)
2015年数据显示,全球宫颈癌的新发病例和死亡数分别为52.76万和26.57万,而发展中国家是其高发区,且近年来有年轻化的趋势[1]。MiR-92a作为微小核糖核酸(miRNAs)中的一员,与血管内皮细胞的形成密切相关[2],且在胃癌、结直肠癌和肝细胞癌等多种肿瘤中高表达,与肿瘤细胞增殖和凋亡等生理过程密切相关[3-5]。有研究指出miR-92a在宫颈癌病人血清中的表达明显升高,且参与宫颈癌的增殖和侵袭[6-7],但其在宫颈癌中的作用及其机制尚不完全明确。故本研究采用RNA干扰其表达,旨在进一步阐明miR-92a对宫颈癌细胞增殖凋亡的影响及可能的分子机制。1材料与方法
1.1细胞和试剂
正常上皮293T细胞和宫颈癌Hela、C33A、Caski细胞均来自中国科学院生物化学与细胞生物学研究所细胞库。引物、miR-92a inhibitor和miR-92a inhibitor NC购于上海吉玛制药技术有限公司,生存素(Survivin)抗体、β肌动蛋白(β-actin)抗体、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和辣根过氧化物酶标记的IgG(HRP-IgG)二抗均购自美国Santa Cruz公司;蛋白提取试剂盒、反转录试剂盒、二喹啉甲酸(BCA)蛋白检测试剂盒、膜联蛋白V-FITC(Anne-xin V-FITC)/碘化丙啶(PI)凋亡试剂盒和ECL发光试剂盒均购自上海碧云天公司 ......
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