1.3.3 实时荧光定量PCR检测细胞中SATB1基因表达 取3组转染后48 h细胞，裂解，提取总RNA，并检测总RNA纯度。按逆转录试剂盒说明书将RNA逆转录为cDNA，按PCR试剂盒说明书以cDNA为模板对引物进行扩增。引物序列见表2。PCR反应条件：95 ℃、30 s，95 ℃、30 s，53 ℃、30 s，60 ℃、30 s，连续进行40个循环。用2-△△Ct法计算细胞中SATB1基因表达量[9-10]。

    1.3.4 MTT法检测细胞增殖能力 取3组细胞，消化，按每孔5×103个接种于96孔板中，继续培养。分别于培养12、24、48、72和96 h时，将MTT液20 μL加入各孔，孵育4 h，弃去上清，将二甲基亚砜150 μL加入各孔，振荡反应15 min，于酶标仪上检测490 nm波长处各孔吸光度(A)值[11-12]。

    1.3.5 划痕实验检测细胞迁移能力 取各组细胞，消化，离心，用无血清培养液重悬细胞，按每孔105个接种于6孔板中，待细胞贴壁融合度达90%以上时 ......