1 材料与方法

    1.1 实验材料

    二甲基亚砜(DMSO)、MPP+购自美国Sigma-Aldrich公司;DEMED/F12培养液购自美国Hyclone公司;青霉素/链霉素溶液购自索莱宝公司;CB2受体激动剂JWH133和抑制剂AM630购自美国Tocris Bioscience公司，用DMSO溶解制成储备溶液(1 mmol/L)置于-20 ℃储存，使用时用培养液稀释至工作浓度;兔源CB2受体抗体购自英国Abcam公司;兔源GAPDH抗体购自博奥森生物技术有限公司;HRP标记山羊抗兔IgG购自联科生物技术有限公司;TRIzol购自南京诺唯赞生物科技有限公司;PCR逆转录试剂盒和SYBR Green购自abm公司;新生SD大鼠购自济南朋悦实验动物繁育有限公司。

    1.2 细胞培养及分组

    取新生24 h SD大鼠中脑，将其置于DEMED/F12基础培养液中，除去脑膜和血管，用1 000、200、10 μL枪头轻轻吹打使其呈浑浊离散状态，收集至大离心管中。离心，弃上清，加入含体积分数0.10胎牛血清、20 g/L青霉素/链霉素的DEMED/F12培养液，吹打混匀后将细胞接种到培养瓶中，在37 ℃、含体积分数0.05 CO2培养箱中差速黏附处理(倒置放置)30 min，隔天更换新鲜培养液培养7 d以上，待细胞长满瓶底90%以上时，置于37 ℃摇床中以210 r/min振荡16～18 h除去其他胶质细胞 ......