miR-141-3p 表达对人异位子宫内膜细胞增殖与凋亡影响及其机制(2)
1 资料与方法1.1 一般资料
2016年2月—2018年10月,选取本院收治的45例子宫内膜异位症病人为研究对象,年龄35~60岁,平均(45.52±5.62)岁。临床分期[8]:Ⅱ期10例,Ⅲ期20例,Ⅳ期15例。所有病人均经手术病理证实为子宫内膜异位症,术前3个月内未服用性激素类药物,于术中切取异位内膜组织。同时,选取同期因妇科良性病变进行子宫切除术的43例病人为对照组,年龄为42~60岁,平均(56.72±7.13)岁。所有病人均经手术病理证实,术中切取正常子宫内膜组织。排除合并其他生殖系统肿瘤者。两组病人年龄、月经周期等相比较差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。本研究经本院伦理委员会批准,病人均知情并签署同意书。
1.2 实验材料
DMEM培养基购自美国Hyclone公司;胰蛋白酶和胎牛血清均购自美国Gibco公司;Ⅰ型胶原酶购自上海百赛生物技术股份有限公司;miR-141-3p mimics、miR-141-3p抑制剂(anti-miR-141-3p)及其各自阴性对照试剂均购自广州锐博生物科技有限公司;Lipofectamine2000购自美国Invitrogen公司;Trizol试剂购自北京全式金生物技术有限公司;反转录试剂盒与实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测试剂盒均购自美国Thermo Fisher公司;MTT细胞增殖检测试剂盒购自上海生物工程股份有限公司;Annexin V-FITC/PI检测试剂盒购自武汉艾美捷科技有限公司;双荧光素酶活性检测试剂盒购自北京索莱宝科技有限公司;RIPA裂解液购自美国Sigma公司;兔抗人Cyclin D1、Bcl-2、P21、Bax抗体购自美国Abcam公司;HRP标记的IgG二抗购自武汉博士德生物工程有限公司;兔抗人HMGB1抗体购自武汉菲恩生物科技有限公司 ......
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