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编号:13469030
hUC-MSCs基因表达及其对金黄色葡萄球菌抗菌活性(3)
http://www.100md.com 2020年8月1日 《青岛大学学报(医学版)》 20204
     倒置显微镜观察显示,培养12 d细小组织块周围见少量细胞,形态小而均一(图1 a);13 d细胞迅速生长(图1 b);14 d部分小组织周围细胞呈小克隆状密集分布生长,长势较强且呈漩涡状密集分布(图1 c);16 d时组织块周围细胞呈鱼群状规律密集排布,可达90%融合度(图1 d)。消化传代后,P1代细胞均匀分布生长(图1 e),计数板计数显示1个100 mm培养皿的细胞总数约为1.5×106个;培养至P4代细胞长满视野,呈明显鱼群状排布(图1 f)。

    2.2 hUC-MSCs的免疫表型

    流式细胞仪检测结果显示,细胞表面CD90+100%,CD105+98.04%,CD73+100%,均>95%;CD34+、CD45+、CD11b+、CD19+、HLA-DR+均<5%;符合hUC-MSCs的免疫表型鉴定标准。

    2.3 过表达慢病毒载体构建及滴度检测

    目的基因载体名称为GV492;克隆位点为Age Ⅰ;荧光标记为gcGFP。目的基因载体元件的顺序为:Ubi-MCS-3FLAG-CBh-gcGFP-IRES-puromycin(图2) ......
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