扁平苔癣皮损组织CD147、MMP-3及MMP-7表达及意义(2)
1.2 主要试剂一抗:包括兔抗人 MMP-3多克隆抗体、兔抗人 MMP-7多克隆抗体、兔抗人 CD147多克隆抗体(均购自北京博奥森生物技术有限公司);通用型二抗PV-6001、二氨基联苯胺(DAB)试剂、免疫组化笔(北京中杉金桥公司)。
1.3 实验方法
将标本切片置于64 ℃的烤片机上60 min后,经脱蜡、抗原修复、体积分数0.03过氧化氢阻断内源性过氧化物酶、加一抗(CD147、MMP-3、MMP-7,滴度分别为1∶300、1∶150、1∶150)、加二抗PV-6001、DAB显色、苏木精复染、脱水、中性树胶封片等步骤,光镜下观察染色情况。
1.4 结果判断
CD147、MMP-3、MMP-7阳性细胞染色淡黄色至棕褐色。光镜下,每张切片随机选取5个视野,每个视野计数100个细胞。染色结果依据半定量法进行判断。染色强度评分:基本不着色0分,淡黄色为1分,棕褐色为2分;阳性细胞百分比评分:<5%为0分,5%~25%为1分,26%~50%为2分,>50%为3分 ......
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