电击免疫途径对DNA疫苗免疫效果影响的研究(2)
1.6 统计学处理 采用两样本均数比较的t检验。
图1 pcDNA3.1-HBsAg(adr型)重组表达质粒的酶切鉴定
2 结果
2.1 pcDNA3.1-HBsAg重组表达质粒载体的构建 通过PCR、限制性双酶切、回收连接等分子克隆技术构建了插入我国adr型HBV表面抗原编码基因加polyA信号的重组载体pcDNA3.1-HBsAg,经酶切鉴定和测序证实插入方向和编码框架正确(图1)。
2.2 转染细胞培养上清和细胞裂解液HBsAg的表达 收集pcDNA3.1-HBsAg质粒转染HepG2细胞48h后上清和细胞裂解液,1:10稀释,ELISA测定HBsAg的表达情况。结果发现,pcDNA3.1-HBsAg转染组转染上清和细胞裂解液的平均O.D.值分别为0.9555±0.0219和1.5110±0.0127 ......
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