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编号:11544640
甘利欣对哮喘大鼠核因子NF-κB及Th2类细胞因子的影响(2)
http://www.100md.com 2007年3月1日 《医药月刊》 2007年第3期
甘利欣对哮喘大鼠核因子NF-κB及Th2类细胞因子的影响
甘利欣对哮喘大鼠核因子NF-κB及Th2类细胞因子的影响
甘利欣对哮喘大鼠核因子NF-κB及Th2类细胞因子的影响

     1 材料与方法

    1.1 材料

    选用健康清洁级Wistar大鼠(由大连医科大学实验动物中心提供 ),月龄6-9个月 , 体重240~320g,共40只,均为雄性。实验前在实验室内喂养观察一周,每笼10只,自由进食进水,饲料为标准颗粒饲料。实验室通风、采光条件良好,室温20℃左右,湿度70%。鸡卵清白蛋白(OVA):Ⅴ级,购自美国Sigma公司。甘利欣针剂浓度0.5%,连云港东方制药厂生产。NF-κB抗体(美国Santa Cruz公司产品);SP试剂盒(北京中山生物技术有限公司产品);DAB显色试剂盒(北京中山生物技术有限公司产品);细胞因子测定试剂盒:购自美国LifeKey公司(上海郎卡公司代理)。10%氢氧化铝凝胶:抗原佐剂,自行配制。雾化器:PariMaster雾化吸入器,由德国百瑞有限公司生产,雾化颗粒在0.5~5.0μm之间。酶标仪:Elx800(美国Bio-Tek Instrument INC)。切片机(德国Leitz公司产品)。

    1.2 方法

    1.2.1 哮喘模型的建立[2]:分别于第1天和第7天致敏大鼠,腹腔注射1ml致敏液(每毫升致敏液含鸡卵白蛋白0.1g、氢氧化铝0.1g、百日咳杆菌原液5×109个/ml),第14天将大鼠放入密封雾化箱内,用1%OVA雾化吸入激发20分钟,连续激发5天. 雾化时见大鼠出现烦躁不安、打喷囔、大小便失禁、抓耳朵、紫绀等症状说明大鼠模型制备成功 ......
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