浅谈PT、APTT检测操作要领
中图分类号：R446.11 文献标识码：B 文章编号：1672-5085(2008)3-0153-02
PT(凝血酶原时间)、APTT(活化部分凝血活酶时间)的半自动或全自动分析已逐渐取代了原有的不敏感的BT和CT而成为DIC。肝病、凝血因子的缺乏或减少及手术患者出血倾向的评估的有效手段。因此PT、ATTP结果的准确性，直接关系到临床诊断的正确性和治疗的有效性。我科于2001年开始使用西班牙生产的BIO-BAS型半自动血凝仪(试剂由上海太阳生物公司提供)，通过近百份标本的测试发现了一些最基本但必须认真注意的问题，现总结如下：
1 血标本的采集应注意的问题
1.1 PT、ATTP凝血检查均使用静脉血，所以采血人员应技术熟练，“一针见血”防止组织损伤引起外源性凝血因子进入针管，且止血带不可束缚过紧，时间过长，否则导致局部血液浓缩及纤溶活性增强。
1.2 凝血实验标本最好不与其它实验一起采集，以减少血液停留在针管中的时间，以便更好的保护凝血因子，且切勿从输液三通管取血。取血注射器的针头长短内径应标准化，国际推荐用21G1.5或20G1.5针头，且拉针栓的速度要慢而均匀，使血液平衡进入防止产生气泡。
1.3 我们采用真空采血，这样可防止因二氧化碳散失而导致的pH值的改变。考虑到结果的精确性，将试管刻度的可能误差控制在既定体积的10%以内。根据ICSH、ICTH推荐使用3.2g/dl(含2H2O或109mmol/L的拘橼酸钠作为凝血因子检查的抗凝剂，血液与抗凝剂的比例必须相当精确，抗凝剂在血液标本中的绝对含量可改变血浆中钙例子浓度，而影响结果。血液与抗凝剂9：1比例混合，实际上指抗凝剂与正常积压血液的血浆之间的比例而言，因此应根据患者红细胞压积状况随时调整抗凝剂用量。
2 设备与仪器应注意的问题
2.1 器皿的要求
贮存和测试时应选用干净没有划痕的试管，酸清洗法(盐酸3mmol/L)是清洗器皿的最佳方法。因残留的酸会改变容器表面的pH值，所以器皿必须彻底冲洗，以减少污染等各种原因造成的误差。
2.2 温度要求
因使用的半自动分析仪，所以要注意仪器预热，同时掌握好反应容器试剂及血浆的预热时间，对仪器要定期进行主要性能参数评价。
3 实验操作应注意的问题
3.1 充分混匀，尽快分离血浆，因PT、APT的检测需用乏血小板血浆，一般必须3000r/min 离心10min同时检查是否溶血、黄疸、脂血和出现凝块。红细胞膜含有磷脂，因此溶血标本具有与血小板第III因子相似的凝血活性，会使APTT值缩短，同样如标本中出现凝块，无论多小，也会影响结果。
3.2 实验结果的准确取决于所用反应物的量，加入顺序及不同反应物的孵育时间，因此每次测试应顺序一致。各种试剂及血浆的加入要避免产生气泡，正确吸取血浆层中的1/3的血浆，血浆在37℃下放置不应超过10min，凝血活酶放置也不能超过说明书所规定时间。
总之，无论使用何种型号分析仪，都应按照仪器操作说明书及有关操作规程进行，使用推荐的配套试剂，校准物及质控品，对异常结果应重复测定，必要时重新采集标本，尽可能减少各种原因引起的假性的PT、APTT的延长与缩短，使检验质量达到一个新水平。, http://www.100md.com(于洪波)
PT(凝血酶原时间)、APTT(活化部分凝血活酶时间)的半自动或全自动分析已逐渐取代了原有的不敏感的BT和CT而成为DIC。肝病、凝血因子的缺乏或减少及手术患者出血倾向的评估的有效手段。因此PT、ATTP结果的准确性，直接关系到临床诊断的正确性和治疗的有效性。我科于2001年开始使用西班牙生产的BIO-BAS型半自动血凝仪(试剂由上海太阳生物公司提供)，通过近百份标本的测试发现了一些最基本但必须认真注意的问题，现总结如下：
1 血标本的采集应注意的问题
1.1 PT、ATTP凝血检查均使用静脉血，所以采血人员应技术熟练，“一针见血”防止组织损伤引起外源性凝血因子进入针管，且止血带不可束缚过紧，时间过长，否则导致局部血液浓缩及纤溶活性增强。
1.2 凝血实验标本最好不与其它实验一起采集，以减少血液停留在针管中的时间，以便更好的保护凝血因子，且切勿从输液三通管取血。取血注射器的针头长短内径应标准化，国际推荐用21G1.5或20G1.5针头，且拉针栓的速度要慢而均匀，使血液平衡进入防止产生气泡。
1.3 我们采用真空采血，这样可防止因二氧化碳散失而导致的pH值的改变。考虑到结果的精确性，将试管刻度的可能误差控制在既定体积的10%以内。根据ICSH、ICTH推荐使用3.2g/dl(含2H2O或109mmol/L的拘橼酸钠作为凝血因子检查的抗凝剂，血液与抗凝剂的比例必须相当精确，抗凝剂在血液标本中的绝对含量可改变血浆中钙例子浓度，而影响结果。血液与抗凝剂9：1比例混合，实际上指抗凝剂与正常积压血液的血浆之间的比例而言，因此应根据患者红细胞压积状况随时调整抗凝剂用量。
2 设备与仪器应注意的问题
2.1 器皿的要求
贮存和测试时应选用干净没有划痕的试管，酸清洗法(盐酸3mmol/L)是清洗器皿的最佳方法。因残留的酸会改变容器表面的pH值，所以器皿必须彻底冲洗，以减少污染等各种原因造成的误差。
2.2 温度要求
因使用的半自动分析仪，所以要注意仪器预热，同时掌握好反应容器试剂及血浆的预热时间，对仪器要定期进行主要性能参数评价。
3 实验操作应注意的问题
3.1 充分混匀，尽快分离血浆，因PT、APT的检测需用乏血小板血浆，一般必须3000r/min 离心10min同时检查是否溶血、黄疸、脂血和出现凝块。红细胞膜含有磷脂，因此溶血标本具有与血小板第III因子相似的凝血活性，会使APTT值缩短，同样如标本中出现凝块，无论多小，也会影响结果。
3.2 实验结果的准确取决于所用反应物的量，加入顺序及不同反应物的孵育时间，因此每次测试应顺序一致。各种试剂及血浆的加入要避免产生气泡，正确吸取血浆层中的1/3的血浆，血浆在37℃下放置不应超过10min，凝血活酶放置也不能超过说明书所规定时间。
总之，无论使用何种型号分析仪，都应按照仪器操作说明书及有关操作规程进行，使用推荐的配套试剂，校准物及质控品，对异常结果应重复测定，必要时重新采集标本，尽可能减少各种原因引起的假性的PT、APTT的延长与缩短，使检验质量达到一个新水平。, http://www.100md.com(于洪波)