开放性创伤感染中细菌的药敏试验分析
【摘 要】目的：寻找实验结果的稳定性和准确性的方法。方法：对133例开放性创伤患者伤口脓液和分泌物，进行细菌鉴定和药敏分析。结果：实验结果证明自动化仪器不仅操作方便简单，而且实验结果稳定可靠。结论：外伤术后发生感染，应进行细菌培养与药敏试验，合理用药，同时应行感染病灶的清除，清除坏死组织与炎性肉芽组织异物，彻底引流或采用闭式冲洗疗法，才能达到良好的效果。
【关键词】感染；细菌；药敏试验
随着科学技术的发展，医院应多采用现代化的全自动分析仪器，节约患者等待病情确诊的时间，保证实验结果的稳定性和准确性。在临床工作中，医生应重视感染细菌的培养、鉴定和药敏试验，从而合理地使用抗生素，而不能按照经验乱用、滥用抗生素。细菌培养结果表明，开放性创伤感染性疾病的致病菌已发生变化，革兰氏阴性杆菌感染率明显上升，革兰氏阳性球菌感染率下降，与刘尚才氏资料相符。
1 材料和方法
1.1 标本采集 选取从2012年3月至2014年3月期间133例开放性创伤患者的伤口脓液和分泌物，送往我院检验科细菌室。患者受伤部位包括上臂、前臂、手、股部、小腿和足。收集标本时注意无菌操作，避免其他外来细菌对实验结果造成影响。
1.2 细菌培养 将标本用生理盐水稀释为一定浓度的菌群，配制琼脂培养基，然后置入BACTEC9120全自动培养仪(BD，USA)进行细菌培养。
1.3 细菌鉴定和药敏试验 将培养分离得到的菌株用Micro Scan Walkaway96全自动微生物分析仪(Siemens，German)及其配套的试剂(鉴定与药敏复合板)进行细菌鉴定和药敏分析。
1.4 质量控制 用卫生部临床检验中心提供的大肠埃希菌(ATCC 25922)和金黄色葡萄球菌(ATCC 25923)作质控标准参考菌株。
2 结果
从133例标本中共分离出114株细菌，阳性率高，达85.7%；其中革兰阳性菌65株(57%)，革兰阴性菌44株(38.6%)，真菌5株(0.4%)。通过Micro Scan W/A96仪器软件分析，我们发现分离率占前6位的细菌分别为大肠埃希菌、凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)、金黄色葡萄球菌(SA)、甲种溶血性链球菌、甲型副伤寒沙门菌和肺炎克雷伯菌，百分比分别为28.5%、19.3%、15.8%、10.5%、6.1%、4.8%。在凝固酶阴性葡萄球菌中，耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)占80.23%；而在金黄色葡萄球菌中，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)占30.60%；除此之外，产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别占其38.67%和46.21%。从药敏分析结果可以看出，革兰阳性球菌对青霉素耐药率最高，可能与青霉素开发早，应用多有关，而其对万古霉素耐药率最低；革兰阴性杆菌对氨苄西林耐药率最高，而对亚胺培南和哌拉西林耐药率最低。结果提示在临床上选用抗生素时，不应随意使用青毒素和氨苄西林这些广谱抗生素，而应针对具体感染选用特殊的抗生素。
3 讨论
本实验采用自动化仪器完成了对创伤感染细菌的培养、鉴定及药敏分析，实验结果和大部分研究报道结果相同[ 1 ]，证明自动化仪器不仅操作方便简单，而且实验结果稳定可靠。大肠埃希菌是人肠道中的正常栖居菌，其致病物质之一是血浆凝固酶，因此其在大多数感染中都是最主要的病原菌，如尿路感染、血液感染等。凝固酶阴性葡萄球菌是在大量头孢菌素和免抑制剂的广泛使用后才成为医源性感染的常见病原菌，特别是MRCNS，其检出率和多重耐药性呈逐年上升趋势，且感染后症状不典型，给临床诊断和治疗带来困难。通过Micro Scan W/A96全自动微生物分析仪，可准确鉴定MRCNS，合理使用抗生素。金黄色葡萄球菌是革兰阳性球菌的代表，是一种常见的病原菌，最早用青霉素治疗SA感染，但由于MRSA逐渐增多，现临床上不使用青霉素，而用红霉素、庆大霉素或万古霉素代替；这和我们的药敏实验结果相一致，我们的研究发现SA对青霉素的耐药率为100%，而对万古霉素的耐药性最低，只有13.2%。超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)主要由大肠杆菌和肺炎克雷伯杆菌产生，这类菌株对青霉素、第三代头孢菌素(头孢噻肟、头胞他啶、头孢哌酮、头孢曲松等)以及单环β-内酰胺类抗生素(氨曲南)耐药，并且ESBLs由质粒介导，容易在细菌中传播，因此快速地筛选出ESBLs菌对治疗感染有重要作用。Micro Scan W/A96全自动微生物分析仪可以快速准确的鉴定并检出ESBLs菌，帮助抑制创伤感染，使患者创伤得以早日恢复。
近年来由于抗生素的广泛使用及细菌变异的频发，使细菌对广谱抗生素的耐药性越来越高，引起人们的重视。在本研究中，我们将对开放性创伤感染伤口的脓液和分泌物进行细菌培养、鉴定和药敏试验，以明确创伤感染中细菌对抗生素的敏感性和耐药性，为临床合理使用抗生素提供依据。我们的实验结果表明不同的菌株其耐药性有明显的不同，常用的抗生素已不能满足抗感染治疗的需求，随着科学技术的发展，医院应多采用现代化的全自动分析仪器，节约患者等待病情确诊的时间，保证实验结果的稳定性和准确性。在临床工作中，医生应重视感染细菌的培养、鉴定和药敏试验，从而合理地使用抗生素，而不能按照经验乱用、滥用抗生素。对于外伤后感染的处理，仅强调合理使用抗生素是不够的，更要强调清创术中操作的无菌观念，充分清洗消毒，切除失活组织，合并骨折时要合理使用固定物，尽量选用外固定器固定骨折，创面要充分引流，对于污染严重、受伤时间超过8h、难以彻底清创的病例创口应延迟闭合。如外伤术后发生感染，应进行细菌培养与药敏试验，合理用药，同时应行感染病灶的清除，清除坏死组织与炎性肉芽组织异物，彻底引流或采用闭式冲洗疗法，才能达到良好的效果[2]。
参考文献
[1] 徐修礼，刘家云.细菌对抗生素耐药机制研究的某些进展[J].国外医学 (临床生物化学与检验学分册)，2002，23(2)：83-85.
[2] 李萍，王怀斌，周玉宽.四肢外伤后感染细菌培养与药敏试验结果分析[J].淮海医药，1999，4(4)：46.(鲁焕云)
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