高效液相色谱法测定苦檀子中β-谷甾醇的含量——基于正交试验优化的皂化反应法△
正己烷,体积,温度,1材料与方法,2皂化法提取苦檀子中β-谷甾醇单因素实验及正交实验优化,3方法学考察,4结果与讨论,5结论
孙倩男 王栋 周雪梅 张建平(内蒙古自治区药品检验研究院-中蒙药标准研究实验室呼和浩特010020)苦檀子,豆科植物厚果崖豆藤Millettia pachycarpa Benth.的干燥成熟种子,植物多分布于福建、广西、四川、贵州、云南等地,具有攻毒止痛、消积杀虫之功效,常用于疥癣疮癞、痧气腹痛、小儿疳积。苦檀子中主要含有鱼藤酮和拟鱼藤酮,除此之外还含有β-谷甾醇(Ⅰ)、齐墩果酸(Ⅱ)、水黄皮素(Ⅲ)、厚果鸡血藤甲素(Ⅳ)等成分[1]。β-谷甾醇是植物甾醇类成分之一,存在于某些植物或种子中,具有降血脂、抗癌、抗炎症等作用,可作为苦檀子质量控制的指标。本实验用HPLC法测定苦檀子中β-谷甾醇含量,由于直接使用溶剂提取β-谷甾醇干扰物质较多,利用β-谷甾醇不发生皂化反应这一特点,通过皂化反应还原大部分干扰物质使得β-谷甾醇可以准确定量。同时通过单因素实验和正交实验对提取方法进行优化,使该法操作简便,定量准确。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器:苦檀子(购于安国云天);β-谷甾醇标准品(纯度:97%)(中国食品药品检定研究院,批号:110851-201608);氢氧化钾(天津南开大学分校特种试剂实验厂,批号:20020410);乙醇(AR)(国药集团化学试剂有限公司,批号:20180223);甲醇(HPLC)(国药集团化学试剂有限公司,批号:WXBC6196V);乙腈(HPLC)(国药集团化学试剂有限公司,批号:WXBC6307V)。远红外鼓风干燥箱(天津市华北实验仪器有限公司);电子天平(赛多利斯科学仪器(北京)有限公司);低速大容量离心机(上海菲恰尔分析仪器有限公司);岛津LC-20A型高效液相色谱仪,配有紫外检测器。
1.2 实验方法
1.2.1 HPLC测定 β-谷甾醇的条件:Apollo C18反相色谱柱(250 mm×4.6 mm ......
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