痔疮胶囊微生物限度检查法验证研究
 |
| 第1页 |
参见附件。
摘要：建立痔疮胶囊微生物限度检查法。关键词：痔疮胶囊；微生物限度检查；方法验证【中图分类号】R965【文献标识码】B【文章编号】1672-8602(2014)04-0120-01痔疮胶囊具有清热解毒，凉血止痛，祛风消肿的功效。用于痔疮，肛裂，大便秘结等症。含有大黄等中药成分。根据其制剂用药途径和制法，应进行细菌数、霉菌和酵母菌数、大肠埃希菌检查。经实验研究，确定采用常规法进行细菌数、霉菌和酵母菌数、大肠埃希菌检查。经对所确定的方法进行验证，符合《中国药典》2010年版一部附录XIIIC有关微生物限度检查法有关规定，方法可行。1实验仪器、试药 1.1实验菌种:枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌、黑曲霉。1.2样品：痔疮胶囊(批号：120301、120402、120603)；生产：广西锦莹药业有限公司。1.3培养基及稀释剂:营养琼脂培养基，BL培养基等。1.4仪器:培养箱、生物安全柜等。2细菌数、霉菌和酵母菌数检验方法的建立及验证 2.1菌液制备:取经35℃培养18～24h的金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌的营养肉汤培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制备成每1ml含菌数为50～100cfu的菌悬液，备用；取经25℃培养24～48h的白色念珠菌液体培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制备成每1ml含菌数为50～100cfu的菌悬液,备用；取经25℃培养1周的黑曲霉斜面培养物，加10 ml 0.9%无菌氯化钠溶液洗下霉菌孢子，吸取菌液用0.9%无菌氯化钠溶液制备成每1ml含菌数为50～100cfu的菌悬液，备用。2.2供试液的制备方法: 常规法：取样品10g，用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液制成1：10的供试液；取1：10的供试液1ml注皿。2.3回收率试验:试验组：同2.2，另分别取各试验菌50～100CFU，分别注入同一平皿中，立即倾注琼脂培养基，待凝固后，置规定温度，细菌培养24～48h，白色念珠菌和黑曲霉培养48～72h。菌液组：取试验菌50～100CFU注入平皿中，立即倾注琼脂培养基，待凝固后，置规定温度，细菌培养24～48h，白色念珠菌和黑曲霉培养48～72h，测定所加入的试验菌数，平行制备2个平皿。供试品对照组：同2.2，立即倾注琼脂培养基，待凝固后，置规定温度，细菌培养24～48h，霉菌和酵母菌培养48～72h，测定供试品本底菌数。2.4方法的确定:选用金黄色葡萄球菌、白色念珠菌作为敏感菌株进行预试验，结果见表1：表1敏感菌株常规法预试验结果 菌种金黄色葡萄球菌(CFU/平皿)白色念珠菌(CFU/平皿)计数平皿平均值平皿平均值试验组959696898587供试品对照组000000菌液组10195959792879591回收率(%)9996结果：金黄色葡萄球菌回收率为99% ......
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件。