RNA干扰沉默卵巢癌SW626细胞CXCR4基因的表达(1)
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摘 要:研究应用RNA干扰技术沉默人卵巢癌SW626细胞趋化因子受体4(CXCR4)基因后,卵巢癌细胞CXCR4的蛋白表达情况,对卵巢癌细胞增殖活性的影响。设计合成两对针对CXCR4基因的siRNA片段,用脂质体转染方法转染至卵巢癌SW626细胞中,荧光显微镜观察检测转染效率,采用Western blot检测RNA干扰后卵巢癌SW626细胞CXCR4蛋白的表达情况。利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测转染前后细胞增殖的情况。结果显示:转染后,卵巢癌SW626细胞CXCR4/β-actin蛋白表达水平降低(P<0.05),卵巢癌SW626细胞的增殖受到明显抑制(P<0.05)。
关键词:RNA干扰;卵巢癌;CXCR4基因
RNA干扰(RNAi)技术是最近几年发展起来的一种阻断基因表达的新方法,是由双链RNA引发的转录或转录后基因沉默机制,具有效率高、特异性高、显效快、可以向子代遗传和同时进行多基因研究等特点,可望成为肿瘤基因治疗的新手段。
卵巢肿瘤是女性生殖器常见肿瘤,其中卵巢上皮性癌约占卵巢恶性肿瘤的90%。卵巢恶性肿瘤的5年生存率仍然较低,仅仅只有25%-30%[1]。
本研究利用可在细胞内自主生成siRNA的表达质粒转染卵巢癌细胞株SW626,观察其对CXCR4蛋白表达的影响,及对卵巢癌细胞增殖的影响。
【中图分类号】R737.31 【文献标识码】A 【文章编号】1672-8602(2014)06-0012-02
1 材料与方法
1.1 材料
卵巢癌细胞株SW626购自南京凯基公司,设计合成两对针对CXCR4基因的siRNA片段及阴性对
照siRNA均由上海吉玛制药技术有限公司 ......
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