地黄试管苗组织培养基中矿质元素含量测定
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摘要：目的建立测定地黄试管苗组织培养基中N，P，K元素含量的方法。方法稀释不同倍数MS培养液模拟不同培养时间的地黄试管苗组织培养基，分别用水杨酸硝化法、钼蓝法、离子选择电极法测定N，P，K元素的含量。结果实验结果表明，作者选用的测定方法简便、快速、易于操作。结果的精密度和准确度均能满足测定要求。结论建立的方法可实际应用于地黄组织培养基中N，P，K元素含量的测定。
关键词：地黄；氮；磷；钾；含量
中图分类号：O613文献标识码：A文章编号：1672-979X(2007)02-0031-03
Assay method of mineral elements in tissue culture medium of test-tube plantlet of Rehmannia glutinosa
LIU Feng ，WEN Xue-Sen
(School of Pharmaceutical Sciences, Shandong University, Jinan 250012, China)
Abstract：Objective To establish a feasible assay methods of N, P and K element in tissue culture medium of test-tube plantlet of Rehmannia glutinosa. Method Contents of N, P and K in tissue culture medium of test-tube plantlet of rehmannia glutinosa were determined by the methods of salicylic acid nitrofication process，molybdenum blue method and ion selective electrode method, respectively. The culture medium had been diluted in different multiple. ResultThe methods were convenient, quick and manipulable. The accuracy and precision of the methods was suitable for the requirement of determination. Conclusion These methods could be used in practical production.
Key words：Rehmannia glutinosa；N；P；K；assay
地黄栽培历史悠久，是大宗的常用栽培药材，年均需求量达1 500万 kg，出口量为 100万 kg，目前已形成了温县、武陟、孟县、博爱、沁阳等县区(原怀庆辖区)为中心的黄河中下游沿岸地黄主产区[1]。
病毒病是影响地黄栽培产量和品质的关键因素之一。20世纪90年代末，温学森等成功地实现了地黄组织培养苗脱毒，目前已得到85-5、金状元和北京-1号3个优良品种的脱毒苗，并成功投入生产。经过3年的田间实验，证明脱毒地黄亩产可达5 000 kg，比带毒地黄增产2~3倍。但脱毒苗在大田栽培过程中，第1年就有30%～50%再度感染病毒，2~3年就要更新一次种苗[2]。因此，如何最大可能地降低脱毒苗组织培养的成本，成为亟待解决的关键问题。为探讨地黄脱毒苗对培养基中各种元素的吸收规律及其对地黄生长的影响，以进一步优化培养基组成，降低培养成本，我们对地黄组织培养基中N，P，K元素的含量测定方法进行了研究。
目前，地黄组织培养多用MS培养基，离子体系非常复杂，而且随着试管苗的生长，其根系可能会不断分泌有机酸、糖类、氨基酸、酚性化合物等根系分泌物进入培养基中，加重了矿质元素含量测定的难度。到目前为止，尚未见组织培养体系中矿质元素含量测定方法的报道。我们以稀释不同倍数的MS培养液模拟不同培养时间的地黄组织培养MS培养基，通过实践，建立了适合地黄试管苗组织培养体系中矿质元素含量测定的方法，为研究地黄脱毒苗对培养基中各元素的吸收规律，进一步优化培养基组成，降低培养成本奠定了基础。
1仪器与试剂
1.1仪器
TU-1800型紫外-可见分光光度计(北京普析通用)；AY120型电子分析天平(日本岛津)；PXSJ-216型离子分析仪(上海精密科学仪器有限公司)；Pk-1型钾离子选择性电极；T-818-B-6型温度传感器；JB-1A型电磁搅拌器；218双盐桥式饱和甘汞电极(外盐桥充以1 mol/L NH4NO3溶液)。
1.2试剂
(1)硝态氮标准溶液优级纯KNO3 0.721 6 g，配置含N量分别为20，40，60，80，100，120 mg/L的系列NO3-N标准溶液；(2)钼酸铵溶液钼酸铵[(NH4)6Mo7O24·4H2O] 13 g，酒石酸锑钾(KSbC4H4O7)0.35 g，分别溶解于100 mL蒸馏水中。不断搅拌下将钼酸铵溶液缓慢加入300 mL硫酸溶液(硫酸-水1∶1，v/v)中，再加入酒石酸锑钾溶液，混合均匀；(3)抗坏血酸溶液抗坏血酸(C6H8O6)10 g ......
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