摘要：目的克隆并表达黄杆菌肝素酶Ⅱ(HepⅡ)的基因。方法通过PCR从黄杆菌基因组DNA中扩增出黄杆菌HepⅡ的基因，经验证后插入到表达质粒pET-28a上构建表达载体，重组质粒转化E.coli BL21(DE3)进行蛋白质表达。结果成功地将PCR扩增得到的测序正确的HepⅡ基因构建入pET-28a载体上，重组质粒转入E.coli BL21(DE3)后表达产物经SDS-PAGE凝胶电泳鉴定得到目的蛋白，测活显示重组HepⅡ具有活性。结论克隆并成功表达了黄杆菌HepⅡ基因。

    关键词：肝素酶Ⅱ；克隆；表达；酶活性

    中图分类号：Q55文献标识码：A文章编号：1672-979X(2007)03-0001-04

    Cloning and Expression of Flavobacteriun heparinum HeparinaseⅡ

    FU Wen-bing，YU Xiao， ZHAO Jian*，FAN Li-qiang， LI Su-xia，YUAN Qin-sheng

    (State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, East China University of Science and Technology, Shanghai 200237, China) ......