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编号:11755737
黄芪多糖的分离和纯化
http://www.100md.com 2007年4月1日 吴 丽 刘婷婷 梁剑锋 余精中
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    参见附件(230KB,3页)。

     摘要:介绍和分析黄芪多糖的分离和纯化方法。

    关键词:黄芪多糖;提取

    中图分类号:Q53文献标识码:A文章编号:1672-979X(2007)04-0062-04

    Separation and Purification of Astragalus Polysaccharides

    WU Li, LIU Ting-ting, LIANG Jian-feng, YU Jing-zhong

    (Light Industry and Food Engineering Institute, Guangxi University, Nanning 530004, China)

    Abstract:The separation and purification methods for astragalus polysaccharides are introduced and analyzed in this paper.

    Key words:astragalus polysaccharides; extract

    黄芪(Radix Astragalus)又名黄耆[1],是豆科植物蒙古黄芪[Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.Var.mongholicus(Bge)Hsiao]或夹膜黄芪[Astragulas membranaceus(Fisch.)Bge.]的干燥根。黄芪是重要的益气补中药,味甘,性微温,可生用,亦可炙用。生用能固表,排毒、抗疮生肌;炙用能益气补中;其皮可利尿逐水湿,且持续时间较长。据报道,用黄芪注射液治疗失眠疗效显著。黄芪还有明显的降压作用,治疗病毒性心肌炎亦有较好疗效[2]。

    药理研究证明,黄芪皂苷和黄芪多糖是黄芪中最重要的天然有效成分,是黄芪药理作用的决定性因素。黄芪多糖能促进T细胞、B细胞、NK细胞等免疫细胞的功能,对艾滋病等多种免疫缺陷症有防治效果,还可双向调节血糖,延缓细胞衰老。

    黄芪多糖还对心血管系统、肝脏、肾脏等具有保护作用。黄芪多糖和人参多糖配伍,可显著提高抗癌活性,降低化疗副作用。黄芪多糖注射液是安全有效的抗肿瘤药。目前黄芪多糖主要出口国外,国内需求量也很大,具有广阔的发展前景[3-4]。现对黄芪多糖的提取、脱蛋白质、纯化、多糖含量测定等的研究进展作一综述。

    1黄芪多糖的提取

    1.1黄芪多糖的提取方法

    1.1.1水煮醇沉法[2]黄芪根粉→不同次数不同量的水煮沸回流不同的时间→合并滤液→调pH为中性→浓缩→加入一定浓度的乙醇或甲醇→离心分离→加水溶解→过滤→滤液浓缩至小体积→加乙醇或甲醇至浓度的80%→乙醇或丙酮洗涤→冷冻(或P2O5)真空干燥→粗多糖。

    1.1.2CaO水提[5]pH9~10的CaO水溶液煮沸提取,浓缩时调pH6.5左右,此后步骤同1.1.1

    1.1.3Na2CO3水提[5]pH9~10的Na2CO3水溶液煮沸提取,浓缩时调pH6.5左右,此后步骤同1.1.1

    1.1.4微波提取微波具有穿透力强、选择性好、加热效率高等特点。微波辐射可大大加快反应速度(最高达1 240倍),反应时间以分、秒计。微波技术用于植物细胞破壁,有效地提高了收率[6]。王莉等首次用微波技术从黄芪中提取黄芪多糖,以石油醚、乙醚除去黄芪中的脂溶性杂质,用80%的乙醇除去单糖、低聚糖及苷类等干扰性成分;置MCL-3型连续微波反应器中继续以水回流提取20 min,调整功率为630,600,560,450 W,减压浓缩至1/2体积,加入0.1%活性炭脱色,过滤;滤液加入95%乙醇溶液使其含醇80%,静置过夜;过滤,残渣用乙醚、无水乙醇反复洗涤,即得黄芪多糖粗品[2]。

    1.1.5超滤法超滤作为膜分离技术,可在常温下操作,不需反复加热和相态转容,有利于保持中药成分的生物活性和物理化学稳定性。它不仅可用于混合液中悬浮和分散物质的纯化和分离,而且可用于去除溶液中的低聚物和大分子物质。因此,越来越多的学者致力于超滤技术在中药成分中的分离、除杂、浓缩等方面的应用与研究[7]。李树珍[8]等用超滤法提取黄芪多糖,黄芪粉水煮后的上清液用中空纤维超滤,选用相对分子质量为6 000的超滤膜,截留下相对分子质量在6 000以上的大分子,经2次醇沉后即得多糖的粗提物。

    1.2提取方法的比较

    1.2.1水煮醇沉提取法工艺操作简单,对多糖的提取比较充分,但收率(约2.5%)和含量较低,周期长,提取过程中耗费大量有机溶剂,成本高。CaO和Na2CO3水提工艺收率显著提高,分别为11.7%和5.7%,成本也明显低于水煮醇提法。

    1.2.2李红民等[5]报道,在用Na2CO3水溶液提取时,滤液不易过滤和浓缩,在浓缩过程中出现大量凝胶状不溶物,水溶时亦有大量不溶物存在,这是Na2CO3提取收率低于CaO水溶液提取法的主要原因。由此推测,碱性的强弱对纤维多糖的结构影响很大,所以在提取黄芪多糖时适宜用较弱的碱性提取液。

    1.2.3微波技术用于黄芪多糖提取可使反应时间缩短为其他方法的1/13左右,多糖含量可达到6.55%左右。

    1.2.4据报道,黄芪多糖的相对分子质量在1万~5万左右,因此在不同提取工艺中用超滤法选择超滤膜相对分子质量为6 000,可将多糖完全提取。

    2黄芪多糖中蛋白质的脱除

    天然植物中多糖与蛋白质2种高分子成分共存,相对分子质量相近。而且多糖常与蛋白质形成糖蛋白复合物,使蛋白质脱除困难。但也许正是由于与蛋白质结合,多糖才具有与蛋白聚糖、糖蛋白相同的生理功能[9]。据报道,黄芪多糖中蛋白质含量较高(≥15%,凯氏定氮法),脱除蛋白质有助于提高其临床效果和扩展应用范围,是多糖精制过程中比较重要的一步。传统的脱蛋白质方法有Sevag法、三氯三氟乙烷法和三氯醋酸法。这几种方法脱除蛋白质的效果虽较好,但都有缺点 ......

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