一种新型凋亡素融合蛋白的克隆表达及活性测定

一种新型凋亡素融合蛋白的克隆表达及活性测定(2)

http://www.100md.com 2009年7月1日《食品与药品·A版》 2009年第7期

     3.2ECSOD3凋亡蛋白的表达

    含重组质粒pET28aECSOD3apoptin的E.coliBL21(DE3)重组菌按2.2项表达，SDSPAGE电泳分析结果见图4。在相对分子质量22000左右有蛋白质表达条带，与预期ECSOD3apoptin的理论分子量一致，表达产物一部分以可溶形式表达，一部分以包涵体形式表达。

    3.3目的蛋白质发酵培养

    为大量制备ECSOD3apoptin目的蛋白质，用LB优化培养基于10L发酵罐进行发酵培养，当菌体密度A600nm达到20后，加入1mmol/LIPTG诱导，诱导0～6h，每隔1h取全菌体留样，测定A600nm值，菌体生长曲线见图5，发酵后收集得到的湿菌体密度约135g/L。

    3.4ECSOD3apoptin的纯化

    将ECSOD3apoptin按2.4项用Ni2+NTA亲和柱纯化，SDSPAGE电泳结果见图6 ......

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