诱导时机对羧肽酶原B包涵体质量和复性率影响的研究(2)
2.3不同诱导时机所得IBs对蛋白酶K的稳定性
蛋白酶K对未折叠好的蛋白区域具有强烈的水解功能,蛋白酶K酶解IBs后,混浊度下降,测A420nm,并对时间作图可得IBs蛋白质的酶解动力学曲线。见图4和图5。
由图4可见,诱导2,3,4h所得包涵体对蛋白酶K的酶解稳定性相差不大。由图5可见不同生长期诱导所得IBs对蛋白酶K的稳定性有明显的不同,蛋白酶K酶解12h(稳定期)和22h(衰亡期)诱导所得IBs的速度慢于1h和3h诱导所得的IBs;8h(对数生长后期)诱导产生的IBs处于两者之间。与表2的复性结果对照,可得出如下结论:IBs复性率越高,对蛋白酶K的稳定性越高,越不易被蛋白酶K酶解 ......
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