TAT-凋亡蛋白质制备与抗肿瘤活性研究

http://www.100md.com 2009年9月1日 高　鹏　赵　健　傅文彬　王富军　袁勤生　刘建文

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     摘要：目的 制备TAT-凋亡蛋白质并研究其抗肿瘤活性。方法将重组质粒pET-28b-TAT-vp3转入Ecoli BL21(DE3)中表达其蛋白质，利用Ni NTA亲和柱纯化目的蛋白质包涵体，纯化样品透析复性后研究其抗肿瘤活性。结果30℃时重组蛋白质包涵体表达量最高，尿素变性条件下用Ni-NTA亲和柱层析纯化包涵体，用500mmol/L咪唑溶液洗脱，从镍柱上解离的目标蛋白质纯度达到92%以上。MTT实验表明，纯化后蛋白质浓度10μg/mL时，HeLa细胞存活率降至42%(IC50=4.2μg/mL)；动物实验表明，样品组抑瘤率可达到48.3%。结论大肠杆菌表达的TAT-凋亡蛋白质具有抗肿瘤效应。

    关键词：TAT-凋亡蛋白；包涵体表达；制备；抗肿瘤活性

    http://www.100md.com/html/paper/1672-979X/2009/09/02.htm

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