大肠杆菌链长控制基因ddsA原位替换及多基因共表达对辅酶Q10合成能力的影响

http://www.100md.com 2009年9月1日 孔　璐　傅　楠　叶　江　吴海珍　张惠展

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     摘要：目的 强化大肠杆菌合成辅酶Q₁₀(coQ₁₀)的能力。方法利用途径工程的基本原理，对大肠杆菌辅酶Q生物合成途径中链长控制基因ispB进行遗传操作，并强化表达该途径中多个功能基因。结果首次成功用来自Gmconobactersuboxydans的十聚异戊二烯焦磷酸合成酶基因ddsA原位替换大肠杆菌染色体上ispB基因，构建得到原位替换株JKL；同时强化表达COQ生物合成途径的相关基因，发现在CA和ddsA协同表达的重组菌pDCA/JKL中CoQ的合成能力比JKL提高了2.3倍，CoQ₁₀合成量提高了2.5倍。检测该重组菌中ubiA的转录水平，发现其mRNA相对拷贝数是对照JKL的125倍。结论成功获得的重组大肠杆菌在降低内源性CoQ₈合成能力的同时具备合成较长侧链CoQ₁₀的能力，且通过强化表达相关基因使合成CoQ₁₀的能力得到了提高。

    http://www.100md.com/html/paper/1672-979X/2009/09/03.htm

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