20h，然后30℃测定脂肪酶的残余活性，由此测定脂肪酶的pH稳定性。

    1.5.3 金属离子和表面活性剂对重组脂肪酶活性的影响 将纯化的脂肪酶与各种金属离子和表面活性剂置于50mmol/L Tris-HC1缓冲液中，终浓度分别为2 mmol/L和0.1%(w/v)，30℃下保温30min，测其残余酶活，由此测定金属离子和表面活性剂对脂肪酶活性的影响。

    1.6 重组脂肪酶的对映选择性水解

    将5mL磷酸盐缓冲液(100 mmol/L，pH 7.5)与5 mL(±)-MPGM的甲苯溶液(100 mmol/L)混合形成甲苯-水两相反应系统，加入10 U纯化后的脂肪酶于30℃和160 r/min反应，定时取样测定反应转化率(c)以及剩余底物的对映体过量值(ee)。取样分析时，将50μL反应液有机相加入450μL含内标对硝基苯乙酮(0.5 mmol/L)的乙酸乙酯中，加无水硫酸钠干燥，然后进行手性高效液相色谱(HPLC)分析。转化率、对映选择率(E)及ee的计算依据文献的方法。

    2 结果与讨论

    2.1 克隆和基因分析

    以S.marcescens ECUl010的DNA为模板 ......