乙酰葡糖胺与对二甲氨基苯甲醛的反应最初由MOiler发现，即当戊-乙酰葡糖胺溶液与稀氢氧化钾共热后，加入盐酸酸化的对二甲氨基苯甲醛溶液(Ehrlich试剂)可产生强紫红色。

    Zuckerkandl和Messiner-Klebermass报道了基于这一反应的定量测定N-乙酰葡糖胺的比色法。他们发现，当N-乙酰葡糖胺(II)与稀碱共热时，醛基和乙酰基反应生成吡咯衍生物(I)，毗咯衍生物与对二甲氨基苯甲醛缩合产生吡咯和Ehrlich试剂反应的特征红色。Ⅳ_乙酰葡糖胺以烯醇式(III)反应并失水生成嗯唑衍生物——2-甲基-4-a-四羟基n-丁基嗯唑(IV)，我们认为是这一物质与酸性溶液中的对二甲氨基苯甲醛缩合产生强紫红色。稀碱对Ⅳ_乙酰葡糖胺的作用稍后详细讨论。

    根据操作，Ⅳ-乙酰葡糖胺(1—4rag)，溶于5mL 60%乙醇溶液，加2滴30%氢氧化钾，沸点加热6-8 s，迅速冷却。加入对二甲氨基苯甲醛试剂1mL，10～15 min后，即可产生与Ⅳ-乙酰葡糖胺标准溶液作相同处理所产生的紫红色。

    当要求准确度和结果重现性时，此方法不可用。以下是确定Ⅳ-乙酰葡糖胺转化成嗯唑衍生物(Iv)的最适条件及每毫克噫唑衍生物与对二甲氨基苯甲醛缩合产生最大色强度的必要因素所进行的调研。

    早期工作发现，很小心地控制乙酰葡糖胺碱性醇溶液的煮沸操作，可产生一个相当可观的转化比，否则会被碱的作用破坏。考虑到在这些条件下，氢氧化钾对Ⅳ.乙酰葡糖胺定量转化成相应嚼唑的显著影响，我们认为，推荐的“2滴30%氢氧化钾”和“沸点加热6-8 s”并没有详细说明被检液中碱的浓度，以及为定量操作提供足够准确的加热时间 ......