两种方法检测血清低水平乙肝病毒表面抗原比较
[摘要]目的：比较时间分辨免疫荧光分析法(TRFIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测低值乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的符合率。方法：分别用国产TRFIA试剂盒和ELISA试剂盒检测血清标本。结果：在234例乙肝病毒表面抗原浓度介于0~0.5 ng/ml的临床标本中，两种方法检测HBsAg同时阳性共41例，其中TRFIA检测阳性有46例，ELISA检测阳性有66例，符合率为87.18%。结论：在国产试剂HBsAg中，TRFIA与ELISA相比，特异性较高但灵敏度较低，在临床应用中应注意0.2~0.5 ng/ml的低值。
[关键词]乙型肝炎；病毒表面抗原；时间分辨免疫荧光分析法；酶联免疫吸附试验
[中图分类号]R511 [文献标识码]B [文章编号]1673-7210(2007)05(b)-094-01
乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)检测是诊断乙型肝炎病毒(hepatits B virus,HBV)感染的重要依据之一，不同人群血清HBsAg浓度可相差成千上万倍，低水平血清HBsAg人群不容忽视，提高HBsAg检测灵敏度有重要意义。许多高灵敏度的测定方法应用于临床免疫学检测，其中酶联免疫法应用最广，我们对低浓度HBsAg人群血清进行了乙肝病毒表面抗原二种检测方法的比较，结果如下：
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 标本
234例标本均来自本院门诊与住院的病人，浓度介于0~0.5 ng/ml。
1.2 仪器
EL311S酶标仪；上海新波ANYTEST-2000型时间分辨荧光测定仪；新波Egate 2310全自动酶标洗板机，新波2510酶标变频振荡器。
1.3 试剂
ELISA试剂采用上海科华，TRFIA试剂采用新波生物科技有限公司；质控品采用卫生部门临床检验中心提供的HBsAg定值质控品(浓度1 ng/mL)。
1.4 方法
, 百拇医药 分别用TRFIA试剂和ELISA试剂检测HBsAg方法检测质控品及血标本中的HBsAg浓度，两种检测方法均严格按照试剂盒说明书进行。
2 结果
ELISA法S/CO≥1.0为阳性，S/CO
3 讨论
乙肝病毒感染是我国最常见的感染性疾病之一，而应用免疫技术测定 HBV 特异性抗原抗体是 HBV 感染诊断的主要手段。由于免疫学技术的不断发展，抗原抗体检测灵敏度明显提高，使低水平 HBV 感染得以检出，对临床诊断及流行病学有重要意义。HBsAg是诊断乙型肝炎病毒感染的指标之一，其结果逐渐引起人们广泛注意，特别是一些低水平的血清HBsAg，由于多种因素的影响容易造成时阴时阳的结果。据有关资料统计显示，低水平的乙肝表面抗原(1~2 ng/mL)并不代表其他的乙肝指标就是阴性或阳性。本资料中234例乙肝病毒表面抗原浓度介于0~0.5 ng/ml的测定结果显示，阳性检测率ELISA>TRFIA，两者的符合率为87.18%，而TRFIA法与免疫发光法在检测HBsAg上符合率为98.8%。以上资料显示，ELISA的灵敏度比TRFIA法高。
, 百拇医药
时间分辨荧光免疫分析技术是一个灵敏度高、特异性强的免疫检测技术，它的基本原理是延迟检测寿命较长的特异性激发荧光以排除非特异性及背景荧光的干扰，当标本中胆红素800 μmol/L，甘油三酯20 nmol/L，血红蛋白18 g/ml时，对TRFIA也无干扰作用[1]。TRFIA法的灵敏度特异性均较好，试验结果可以保存较长时间，由于可进行定量分析，这对药物疗效观察和病情监测具有重要意义。
酶联免疫法的优点在于它的操作简单，适用于大批量标本的检测，且成本低廉，其灵敏度也很好，但要注意其一些影响因素，内源性物质(补体、AFP、RF、自身抗体)的干扰和外源性物质(血液抗凝剂)[2]、试剂盒质量(特别是抗体包被的质量)等均可影响ELISA检测结果准确度，对其检测的弱阳性标本应复查，以减少误报。
综上所述，国产HBsAg试剂盒中，TRFIA与ELISA相比，特异性较高但灵敏度较低，在临床应用中应注意0.2~0.5 ng/ml的低值报告。
[参考文献]
[1]陶义训.免疫学与免疫学检验[M].第2版.北京：人民卫生出版社,1989.146-1535.
(收稿日期：2007-05-01), 百拇医药(刘金彪 吴大富 田文武 杨晓东)
[关键词]乙型肝炎；病毒表面抗原；时间分辨免疫荧光分析法；酶联免疫吸附试验
[中图分类号]R511 [文献标识码]B [文章编号]1673-7210(2007)05(b)-094-01
乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)检测是诊断乙型肝炎病毒(hepatits B virus,HBV)感染的重要依据之一，不同人群血清HBsAg浓度可相差成千上万倍，低水平血清HBsAg人群不容忽视，提高HBsAg检测灵敏度有重要意义。许多高灵敏度的测定方法应用于临床免疫学检测，其中酶联免疫法应用最广，我们对低浓度HBsAg人群血清进行了乙肝病毒表面抗原二种检测方法的比较，结果如下：
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 标本
234例标本均来自本院门诊与住院的病人，浓度介于0~0.5 ng/ml。
1.2 仪器
EL311S酶标仪；上海新波ANYTEST-2000型时间分辨荧光测定仪；新波Egate 2310全自动酶标洗板机，新波2510酶标变频振荡器。
1.3 试剂
ELISA试剂采用上海科华，TRFIA试剂采用新波生物科技有限公司；质控品采用卫生部门临床检验中心提供的HBsAg定值质控品(浓度1 ng/mL)。
1.4 方法
, 百拇医药 分别用TRFIA试剂和ELISA试剂检测HBsAg方法检测质控品及血标本中的HBsAg浓度，两种检测方法均严格按照试剂盒说明书进行。
2 结果
ELISA法S/CO≥1.0为阳性，S/CO
3 讨论
乙肝病毒感染是我国最常见的感染性疾病之一，而应用免疫技术测定 HBV 特异性抗原抗体是 HBV 感染诊断的主要手段。由于免疫学技术的不断发展，抗原抗体检测灵敏度明显提高，使低水平 HBV 感染得以检出，对临床诊断及流行病学有重要意义。HBsAg是诊断乙型肝炎病毒感染的指标之一，其结果逐渐引起人们广泛注意，特别是一些低水平的血清HBsAg，由于多种因素的影响容易造成时阴时阳的结果。据有关资料统计显示，低水平的乙肝表面抗原(1~2 ng/mL)并不代表其他的乙肝指标就是阴性或阳性。本资料中234例乙肝病毒表面抗原浓度介于0~0.5 ng/ml的测定结果显示，阳性检测率ELISA>TRFIA，两者的符合率为87.18%，而TRFIA法与免疫发光法在检测HBsAg上符合率为98.8%。以上资料显示，ELISA的灵敏度比TRFIA法高。
, 百拇医药
时间分辨荧光免疫分析技术是一个灵敏度高、特异性强的免疫检测技术，它的基本原理是延迟检测寿命较长的特异性激发荧光以排除非特异性及背景荧光的干扰，当标本中胆红素800 μmol/L，甘油三酯20 nmol/L，血红蛋白18 g/ml时，对TRFIA也无干扰作用[1]。TRFIA法的灵敏度特异性均较好，试验结果可以保存较长时间，由于可进行定量分析，这对药物疗效观察和病情监测具有重要意义。
酶联免疫法的优点在于它的操作简单，适用于大批量标本的检测，且成本低廉，其灵敏度也很好，但要注意其一些影响因素，内源性物质(补体、AFP、RF、自身抗体)的干扰和外源性物质(血液抗凝剂)[2]、试剂盒质量(特别是抗体包被的质量)等均可影响ELISA检测结果准确度，对其检测的弱阳性标本应复查，以减少误报。
综上所述，国产HBsAg试剂盒中，TRFIA与ELISA相比，特异性较高但灵敏度较低，在临床应用中应注意0.2~0.5 ng/ml的低值报告。
[参考文献]
[1]陶义训.免疫学与免疫学检验[M].第2版.北京：人民卫生出版社,1989.146-1535.
(收稿日期：2007-05-01), 百拇医药(刘金彪 吴大富 田文武 杨晓东)