液基细胞学检测对痰标本肿瘤细胞诊断的意义
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[摘要]目的：探讨液基细胞学检测对痰标本肿瘤细胞诊断的意义。方法：对109例痰标本进行液基细胞薄层涂片法处理并与传统细胞涂片方法对比。结果：应用液基薄层细胞涂片在痰标本中查到恶性肿瘤细胞16例,可疑瘤细胞2例。传统涂片4例被漏诊。液基薄层细胞涂片法诊断灵敏度提高22.2%。结论：液基薄层细胞涂片方法在痰标本的诊断中优于传统细胞涂片法。
[关键词]液基细胞学；恶性肿瘤；痰标本；诊断
[中图分类号]R446.19 [文献标识码]A [文章编号]1673-7210(2007)06(c)-135-02
国内已有很多家医疗机构开展液基细胞学薄层涂片方法，大多用于妇科阴道/宫颈上皮内病变诊断与筛查，用于痰标本细胞学检查少有报道。本文就我科应用该方法对痰标本的检查结果、临床意义及推广价值作一报道：
1 材料与方法
1.1 标本
随机取自2005年9月~2006年12月本院临床送检的痰标本共计109例。
1.2 液基细胞标本采集及处理方法
等体积痰液与消化液混合，每10 ml混合液加入1 ml黏液溶解液，充分混匀，静置30 min，将混合液在振荡器上震动10 s或人工用力晃动30 s(如果混合液中仍有凝块，可增加一些黏液溶解液溶解振荡混匀)，将混合液倒入离心管中离心(600 r/min)10 min。离心后倒掉上清液加5 ml缓冲液，重新振荡混匀，将溶液倒入离心管中，离心(600 r/min)5 min。离心后倒掉上清液，振荡混匀，放入机器上，自动涂片，巴氏染色。全部过程需要100 min。
1.3 瘤细胞学诊断
采用3级分类诊断法，即将细胞检查结果分为阴性、可疑、阳性，并对瘤细胞作出分型，对分型不清的肿瘤细胞及难以判断瘤细胞来源的可通过免疫细胞化学方法鉴别诊断。所有细胞标本同时作传统涂片方法对比。
2 结果
2.1 两种检测方法检测结果比较
109例痰标本共检出恶性肿瘤细胞16例(腺癌细胞3例，鳞癌细胞13例)，可疑瘤细胞2例。16例肿瘤细胞中，传统细胞涂片检查有4例鳞癌为阴性报告，痰液基薄层细胞涂片法阳性敏感度提高了22.22%。因临床送检病例和标本合格与否等因素难以控制，本文对肿瘤检出率、漏诊率未做总结，只对肿瘤阳性符合率及与传统涂片诊断提高敏感度进行对比(表1)。
上述诊断结果均由CT、核磁共振、气管镜及术后组织病理学所证实。
2.2 液基细胞学恶性肿瘤细胞形态特征
2.2.1 鳞状细胞癌多为散在分布，核大、浓染、固缩，有的染色质呈团块状，胞浆丰富粉染，拉长似蝌蚪状，为高分化细胞癌，痰检未见三维结构。
2.2.2 腺型细胞癌多呈乳头状或管状腺样排列或三五成群，形成立体三维结构，清晰度多层面，核大小不等，核质细腻，有的空亮，核膜清晰。高分化腺癌胞浆丰富，多空亮，但核浆比例失调；低分化腺癌细胞胞浆少，免疫细胞化学CEA强阳性。
2.3 液基薄层细胞涂片标本满意度
液基薄层细胞涂片面积为134 mm2，涂片面积虽小，但16例阳性诊断涂片中均具备充足的有效诊断细胞，背景清晰，无污染，细胞可见三维结构，核质明了，且制片、染色俱佳。
2.4 传统细胞涂片恶性肿瘤细胞形态特征
恶性肿瘤细胞多在污秽背景之中散在或成群排列，虽然瘤细胞有明显异型性，但细胞缺乏完整性，胞核结构模糊不清，且多混杂于黏液坏死物之中，故极易漏诊。
3 讨论
诊断细胞病理学是临床诊断病理学一个重要组成部分,它经历了脱落细胞学,临床肿瘤细胞学,细胞诊断学及鉴别诊断细胞病理学几个阶段。以往肿瘤细胞的阳性诊断率严重滞后,传统涂片以痰液为例,其假阴性约为30%。究其原因：其一，标本采集及处理方法单一、原始，致使镜下所见多为变性、坏死细胞或涂片过厚、不均；其二，传统涂片多为自然干燥或风干，致使涂片未能湿性固定，造成肿瘤细胞人工变形，着色不清。近年来，诊断细胞病理学提高到分子生物水平，液基薄层细胞涂片法不仅变革了标本采集和处理方法，而且获得优良的制片质量、满意的观察效果，有效地提高了诊断细胞病理学鉴别诊断的能力。
液基薄层细胞涂片的痰标本，经处理液处理后不仅去除了黏液、红细胞，而且保存了细胞完整无损，细胞核、核质、核仁更加细腻、清楚，获得了三维立体结构，同时还保全了细胞抗原的生物特性，对细胞免疫化学染色无任何影响，有利于肿瘤细胞的鉴别诊断。
痰检肿瘤细胞传统涂片漏诊4例的原因，主要是标本取材不准，多未见到有效诊断细胞，加之背景、黏液、炎性细胞过多、过厚。当观察到具有癌性改变情况下，重新全部采集标本进行痰液基薄层涂片检查，结果在去除黏液、红细胞、背景之薄层涂片之中，肿瘤细胞散在可见。重新复核传统涂片，在粘液、炎性细胞束中隐约可见一些异型细胞，但模糊不清，难以明确诊断。
液基薄层细胞涂片的涂片面积比传统涂片面积缩小，但细胞的总采集量大大增加。传统细胞涂片法以痰为例，仅是一口痰的一小部分采集到玻片上，而液基薄层细胞涂片法却是整口痰经处理后全部被采集到玻片上，且可采集2张玻片以上。单片面积缩小，有利于更仔细地阅片，传统涂片阅片需7 min，液基薄层细胞学检测阅片时间平均为3 min ......
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