Cx26和Cx43在大鼠胚胎肝发育过程中的时空表达
1 材料与方法1.1 实验动物
成年未经产SD大鼠,质量(220±20) g,由潍坊医学院实验动物中心提供。鼠颗粒饲料喂养,常规饮水,于晚7~9点时与雄鼠1∶1合笼,次日做阴道涂片,查有精子者定为受精第1天,实验分为8~20 d胎鼠(E8d~E20d)及新生1 d鼠(P1d)组,共14组,每组3只,E8d~E17d组取整个胚胎,E18d~E20d及P1d组取单独的肝脏。
1.2 免疫组化染色
常规石蜡包埋,制5 μm厚的连续切片,行免疫组织化学染色(SABC法),抗Cx26和Cx43抗体(1∶200,Santa Cruz公司),4℃孵育过夜,羊抗兔IgG及SABC液(1∶200,Santa Cruz公司)室温下孵育2 h,DAB显色,苏木素复染。以PBS代替一抗作阴性对照,光学显微镜下观察、拍照。
2 结果
2.1 Cx26在大鼠胚胎肝发育过程中的表达
E8d时内胚层细胞中无Cx26的表达,E9d~E14d时组成胚胎肝的细胞Cx26仍呈阴性,Cx26在E15d开始表达,此时部分肝细胞呈Cx26阳性反应 ......
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