大肠癌及癌前病变中Bck-2、Ki-67、C-erbB-2蛋白的表达及意义(2)
1.2 免疫组化染色
标本均经10%甲醛固定，石蜡包埋切片，切取4 μm厚切片，分别进行苏木精-伊红染色和S-P法进行Bcl-2、Ki-67、C-erbB-2免疫组化染色。S-P免疫组化试剂盒、Bcl-2、Ki-67、C-erbB-2鼠抗人单克隆抗体均购自福州迈新公司。严格按照试剂盒及抗体的要求操作程序进行。DAB显色、苏木精复染、中性树胶封固、阳性对照用已知的阳性片作对照，阴性对照用PBS代一抗。
1.3 结果判断
Bcl-2胞膜/胞浆、C-erbB-2胞膜/胞浆、Ki-67细胞核出现黄色或棕黄色颗粒为阳性标志。每张切片观察5个高倍镜视野。每个视野计数100个肿瘤细胞，取其平均值为细胞的阳性率，参照文献[1～3]方法，阳性细胞数≥50%为强阳性(+++)，30%～49%为阳性(++)，10%～29%为弱阳性(+)，0.05)。
2.4 Bcl-2、Ki-67、C-erbB-2蛋白阳性与大肠癌组织分级和淋巴结转移的关系(表1)
由表1可见，C-erbB-2阳性表达率低分化癌显著高于高分化癌(P0.05)。
Ki-67为细胞增殖的一种标记。在细胞凋亡中S、G2、M期均有表达，它是一种核增殖抗原，主要定位于细胞核，与细胞周期密切相连，在有丝分裂中起着维持DNA有规则结构的重要作用。本研究显示：腺癌中的阳性表达强度及表达率均显著高于腺瘤(P0.05)，有淋巴结转移和无淋巴结转移的表达状况差异无显著性(P>0.05)。结果表明，ki67阳性表达及表达强度对诊断腺癌和监视腺瘤癌变有重大意义，对大肠癌的早期发现有较高价值，而与大肠腺癌的分化程度和淋巴结转移无明显相关性。国外有学者研究指出：癌细胞分化程度越低，伴有淋巴结转移者Ki-67表达越强[5]。本结果似有不同，有待进一步研究。
C-erbB-2癌基因又称neu或HER-2，是一个生长因子受体。研究表明，C-erbB-2癌基因的扩增及其蛋白产物在某些腺癌组织中过度表达与预后密切相关[6,7]。另外，本研究显示，腺瘤的C-erbB-2阳性表达率高于正常黏膜，但无统计学意义(P>0.05)，而腺癌显著高于腺瘤(P, 百拇医药(梁喜林 刘志远 赵 红 郑晓芙)
标本均经10%甲醛固定，石蜡包埋切片，切取4 μm厚切片，分别进行苏木精-伊红染色和S-P法进行Bcl-2、Ki-67、C-erbB-2免疫组化染色。S-P免疫组化试剂盒、Bcl-2、Ki-67、C-erbB-2鼠抗人单克隆抗体均购自福州迈新公司。严格按照试剂盒及抗体的要求操作程序进行。DAB显色、苏木精复染、中性树胶封固、阳性对照用已知的阳性片作对照，阴性对照用PBS代一抗。
1.3 结果判断
Bcl-2胞膜/胞浆、C-erbB-2胞膜/胞浆、Ki-67细胞核出现黄色或棕黄色颗粒为阳性标志。每张切片观察5个高倍镜视野。每个视野计数100个肿瘤细胞，取其平均值为细胞的阳性率，参照文献[1～3]方法，阳性细胞数≥50%为强阳性(+++)，30%～49%为阳性(++)，10%～29%为弱阳性(+)，0.05)。
2.4 Bcl-2、Ki-67、C-erbB-2蛋白阳性与大肠癌组织分级和淋巴结转移的关系(表1)
由表1可见，C-erbB-2阳性表达率低分化癌显著高于高分化癌(P0.05)。
Ki-67为细胞增殖的一种标记。在细胞凋亡中S、G2、M期均有表达，它是一种核增殖抗原，主要定位于细胞核，与细胞周期密切相连，在有丝分裂中起着维持DNA有规则结构的重要作用。本研究显示：腺癌中的阳性表达强度及表达率均显著高于腺瘤(P0.05)，有淋巴结转移和无淋巴结转移的表达状况差异无显著性(P>0.05)。结果表明，ki67阳性表达及表达强度对诊断腺癌和监视腺瘤癌变有重大意义，对大肠癌的早期发现有较高价值，而与大肠腺癌的分化程度和淋巴结转移无明显相关性。国外有学者研究指出：癌细胞分化程度越低，伴有淋巴结转移者Ki-67表达越强[5]。本结果似有不同，有待进一步研究。
C-erbB-2癌基因又称neu或HER-2，是一个生长因子受体。研究表明，C-erbB-2癌基因的扩增及其蛋白产物在某些腺癌组织中过度表达与预后密切相关[6,7]。另外，本研究显示，腺瘤的C-erbB-2阳性表达率高于正常黏膜，但无统计学意义(P>0.05)，而腺癌显著高于腺瘤(P, 百拇医药(梁喜林 刘志远 赵 红 郑晓芙)