灯盏花素前体脂质体胶囊突释的评价方法(2)
 |
| 第1页 |
参见附件(274KB，2页)。
2.9 线性关系的考察
精密称取野黄芩苷对照品5.31 mg，置50 ml量瓶中，加甲醇适量，超声使溶解，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，得浓度为106.2 μg/ml的贮备液。精密量取贮备液0. 5，1.0，2.0，4.0，8.0 ml，置25 ml量瓶中，加甲醇至刻度，得到相应浓度的系列标准溶液，分别精密吸取各系列标准溶液20 μl注入液相色谱仪，测定峰面积。以浓度X为横坐标，峰面积Y为纵坐标，进行线性回归，得回归方程：Y=48 228X-20 573，r=0.999 95(n＝5)。野黄芩苷在2~50 μg/ml范围内浓度和峰面积呈良好的线性关系。
2.10 稳定性试验
取供试品溶液及突释样品溶液各20 μl，分别在0，2，4，6，8，10 h进行测定，所测得RSD值分别为1.34%，1.87%。表明供试品溶液及突释样品溶液在10 h内稳定。
2.11 精密度试验
精密吸取浓度为8.00 μg/ml的野黄芩苷对照品溶液20 μl注入液相色谱仪，连续平行分析6次，量取主峰面积，测得RSD值为1.56%。结果见表1。
2.12 重复性试验
分别取平行制备的供试品溶液及突释样品溶液6份，进样测定，总药物和游离药物的峰面积RSD分别为1.91%，1.16%。结果见表2和表3。
2.13 加样回收试验
取胶囊5粒，去壳，将内容物混匀，取适量(约相当于0.5粒的重量)，精密称定，按照含量测定项下的方法，依法操作，精密加入一定量的对照品，加甲醇至刻度，得低、中、高三个浓度的样品溶液。进样分析，进样量为20 μl，计算测得量。测得量和已知量之差与实际加入量相比较，即得回收率。结果平均加样回收率为103.32%，RSD 为1.12%(n＝9)。
2.14 突释考察
0.5 h时释放量＝游离药物量/总药量，若此数值低于40%，则突释效应不明显，若高于40%，则有突释效应。
3 讨论
本试验旨在建立有效的测定灯盏花素前体脂质体释放量的方法，并根据此，对是否存在突释行为进行判断。
3.1 释放介质的选择
前期试验中，通过对灯盏花素在不同溶液中稳定性的考察发现，EDTA和NaHSO3有明显提高灯盏花素稳定性的作用，并且两者合用效果优于单用，所以在选择释放介质时，加入了0.1%EDTA和5%NaHSO3。
3.2 释放介质体积的选择
参照《中国药典》2005年版二部附录ⅩD释放度测定法，选择250 ml为本品突释介质的体积。
3.3 图谱说明
总药物供试品中，在10 min左右出现一个小峰，推测为灯盏甲素的峰。而游离药物供试品在5 min内出的峰，应为释放介质中的EDTA峰。
3.4 透析法的选择
本试验所用透析袋可截留分子量为10 000，而灯盏乙素的分子量为462.35，故能自由分布在透析袋两侧。脂质体为磷脂分散在水相中自发形成的双分子层囊泡，药物在脂质体形成过程中，可能镶嵌于膜上，或者被包裹在内水相中，或者游离在脂质体外。当脂质体进入体内时，游离药物或者镶嵌于膜上的药物快速进入机体是造成脂质体突释效应的主要原因。本试验采用透析法，能简便准确测定游离药物量。
[参考文献]
[1]钟海军,邓英杰.灯盏花素新剂型研究进展[J].中成药,2005,27(8):950-953.
[2]葛庆华,周臻,支晓瑾,等.灯盏花素在犬体内的药动学和绝对生物利用度研究[J].中国医药工业杂志,2003,34(12):618-620.
[3]Vladimir Torchilin, Volkmar Weissing. Liposomes: A Practical Approach[M]. Oxford：Oxford University Press, 1990.105.
(收稿日期：2008-01-03)
注：本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(274KB，2页)。