发酵纳豆中加入中药后对纳豆激酶活力的影响(2)
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1.3 纤维蛋白-琼脂糖平板法
1.3.1试剂的配制
1.3.1.1 磷酸盐缓冲液(0.01 mmol/L, pH 7.75)取磷酸氢二钠3.58 g加水至1 000 ml;取磷酸二氢钠0.78 g,加水至500 ml。两液按1 000 ml∶190.5 ml混合(pH 7.75)。
1.3.1.2 工作液 取磷酸盐缓冲液(0.01 mmol/L)-0.9%氯化钠(1∶17)混匀,备用。
1.3.1.3 1%琼脂糖液取琼脂糖1 g,加工作液100 ml,加热溶解。
1.3.1.4 纤维蛋白原液取纤维蛋白原148 mg,加工作液配成0.3%的溶液。
1.3.1.5 凝血酶原溶液取凝血酶原1 000U,加生理盐水100 ml,配成浓度为10 U/ml的溶液。
1.3.2 平板的制备取琼脂糖融化后,吸取16.2 ml加入到50 ml三角瓶里,放50℃水浴中保温,同时将纤维蛋白原液16.2 ml、凝血酶原液1.3 ml亦在50℃水浴中加热和保温,待温度平衡后,将其混匀,迅速倒入9 cm×9 cm特制的玻璃平板中,室温放置30 min凝固即成。
1.3.3 标准品溶液取尿激酶1支(1 000 U/支),用0.9%氯化钠溶液配成每1 ml中含100、80、60、40、20 U 的5个浓度溶液 ......
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