膜片钳与单细胞RT-PCR技术相结合应用于神经细胞研究的进展(1)
[摘要] 膜片钳与单细胞RT-PCR技术相结合应用于神经细胞的研究,从电生理学和分子生物学角度揭示了神经细胞功能活动与结构之间的相互联系,使单个神经细胞离子通道的生物物理学和药理学特性得以表现,同时可以在同一细胞筛选出特异性的mRNA表达。目前,这两种技术的结合已有多方面的应用,并取得了重要的进展。[关键词] 神经细胞;膜片钳技术;单细胞RT-PCR
[中图分类号]R34 [文献标识码]A [文章编号]1673-7210(2008)04(a)-015-02
膜片钳技术(patch-clamp technique)是1976年由Neher和Sakmann[1]在电压钳基础上发展而来的一种记录细胞膜离子通道电生理活动的技术。后经Hamill[2]等进一步完善,其电流测量灵敏度已达1 PA,空间分辨率达1 m,时间分辨率达10 s,并已发展出许多适合不同需要的记录模式。它能分辨通过细胞膜单个通道的电流,对通道电导及其动力学特性、药理学特性和调节机制进行研究,为通道分型提供了可靠标准;同时它扩展了电生理技术的应用范围,以往难以研究的哺乳类动物小细胞或脆性很大的细胞等,均可采用膜片钳技术进行研究。另外,应用膜片钳技术还可准确监测出与细胞分泌相关的膜电容的微小变化,因而它还是一种研究细胞分泌机制的电生理新方法。
聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术是一种在体外由引物介导的特定DNA序列的酶扩增 ......
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