黄芪煎剂对肾病综合征大鼠免疫因子IL-2的影响
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[摘要] 目的:观察黄芪煎剂对肾病综合征大鼠免疫因子IL-2(白细胞介素2)的影响,验证其对肾病综合征大鼠的治疗作用,为临床用药提供依据。方法:按Bertain等方法,制作大鼠肾病综合征模型。将雄性Wistar大鼠30只随机分为正常对照组、模型组[按6.5 mg/kg体重一次性尾静脉注射阿霉素,注射后14 d模型形成,并于第15日开始灌胃给予生理盐水,剂量按8 ml/(kg·d)]、黄芪煎剂组[造模同模型组,并于第15日开始灌胃给予黄芪煎剂,剂量按8 ml/(kg·d)],均给予灌胃14周。于给药14周后处死大鼠,采用ELISA法测定IL-2的诱生水平。结果:模型组与正常对照组的IL-2诱生水平比较有显著性差异(P<0.05),黄芪煎剂组与模型组的IL-2诱生水平比较具有显著性差异(P<0.05)。结论:黄芪煎剂可以通过上调IL-2的诱生水平而提高肾病综合征大鼠的免疫功能。
[关键词] 黄芪;IL-2;肾病综合征;大鼠;免疫功能
[中图分类号]R692 [文献标识码]B [文章编号]1673-7210(2008)04(b)-070-01
肾病综合征(NS)是肾内科的常见病和难治病。对于肾病综合征的治疗,自从20世纪50年代开始用肾上腺糖皮质激素及70年代后加用免疫抑制剂后,虽然近期疗效有一定提高,但却难以巩固,患者免疫功能明显低下,尤其在应用激素及免疫抑制剂治疗后,更易并发感染。因此如何有效地治疗和控制疾病,减轻激素等的毒副作用,改善患者机体的免疫功能,是临床上一直探求的问题。
文献资料中, 黄芪对肾脏病变的作用虽有报道,但多为临床报道,缺乏相应的动物实验数据。我们应用黄芪治疗NS,每获良效,但其治疗疾病的机制尚不明确。为此,我们又进行了黄芪煎剂治疗肾病综合征大鼠的免疫学研究,以期提示中药治疗NS的免疫机制,并为临床选择用药提供帮助。
1材料与方法
1.1动物模型与分组
按Bertain等[1]方法,制作大鼠肾病综合征模型。将30只健康雄性Wistar大鼠[湖南中医药大学动物实验中心提供,体重(180.00±4.28) g]常规下适应饲养1周后随机分为3组, 正常对照组(正常饮水饮食)、模型组[按6.5 mg/kg体重一次性尾静脉注射阿霉素,注射后14 d模型形成,并于第15日开始灌胃给予生理盐水,剂量按8 ml/(kg·d)]、黄芪煎剂组[造模同模型组,于造模后第15日开始灌胃给予黄芪煎剂,剂量按8 ml/(kg·d)。黄芪煎剂制备由湖南中医药大学制剂科制成水煎剂。规格:每毫升含药0.8 g,批号051028)],每组各10只。于给药14周后处死各组大鼠,无菌取脾,常规制备细胞悬液。
1.2检测指标及方法
IL-2的诱生水平:取细胞悬液,调整细胞浓度为3×105个/ml,与刀豆蛋白A(ConA)20 μg/ml于37℃ ,5%CO2条件下共同培养48 h,收集上清液作为待测IL-2标本。IL-2标本测定采用ELISA法,试剂盒由深圳晶美生物医学公司提供,严格按说明书进行操作。
1.3统计学方法
完全随机设计多样本均数的计量资料用方差分析。统计过程全部在SPSS13.0中进行。
2结果
各组IL-2的诱生水平比较,模型组较正常对照组明显降低,其差异有统计学意义(P<0.05),黄芪煎剂组上述指标较模型组明显增高,其差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。
3讨论
肾病综合征(NS)的发病机制目前尚不十分清楚,近年多数学者认为与T细胞功能紊乱、循环中的淋巴产物或某些细胞因子等有关,这些因素作用于肾小球滤过膜而致病[2、3] 。细胞因子作为淋巴细胞分泌的重要免疫活性物质,其功能是多方面的。IL-2(白细胞介素2)是辅助性T淋巴细胞(TH)分泌的一种调节免疫应答的重要介质,能促进T、B细胞的增殖和分化,诱导多种细胞因子的产生以及细胞因子受体的表达、激活巨噬细胞,刺激NK细胞,增强NK细胞杀伤功能等,是免疫应答过程中重要的细胞因子。肾病鼠淋巴细胞IL-2诱生水平低下,说明存在着免疫功能的低下。
黄芪对T淋巴细胞和B淋巴细胞有较好的保护作用和双向调节作用,能明显刺激T、B淋巴细胞的活性,增强T淋巴细胞的增殖,对淋巴细胞具有明显的直接活化作用,从而对T淋巴细胞介导的细胞免疫功能具增强和调节作用[4],黄芪中的黄芪多糖(APS)可纠正IL-2(白细胞介素2)产生的受抑状态,提高IL-2的诱生水平[5]。本研究中,黄芪煎剂组治疗的肾病综合征大鼠IL-2水平与正常鼠比较无明显差异,说明黄芪具有提高IL-2的诱生水平,改善肾病综合征大鼠低下的免疫功能的作用,为临床用药提供了实验依据。
[参考文献]
[1]Bertain T, Andreina P, Bid D,et al. Adriamycin-induced nephrotic syndrome[J].Lab Invest, 2002,46:16.
[2]Yap HK,Cheung W,Murugasu B,et a1.Thl and Th2 cytokine mRNA profiles in childhood nephrotic syndrome:evidence forincreased IL-13 mRNA expression in relapse[J].J Am SocNephrol,1999,10(3):529-537.
[3]Stachowski J,Barth C,Michalkiewicz J,et al.Th1/Th2 balance and CD45-positive T cell subsets in primary nephrotic syndrome[J].Pediatr Nephrol,2000,14(8-9):779-785.
[4]毛小娟,王军志,王风连.红芪多糖和黄芪多糖的免疫调节作用[J].中国药理学通报,2003,5(6):367-371.
[5]庄茂辛,吴耀生,李曼玲.黄芪、党参、人参多糖对豚鼠免疫功能的影响[J].中国药学杂志,2002,27(11):653-655.
(收稿日期:2008-01-04)
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