慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA与病毒复制水平相关性分析
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[摘要] 目的：通过检测180例慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA和HBV-M含量，探讨不同类型慢性乙型肝炎患者病毒复制水平与HBV标志物(HBV-M)模式及肝损害程度的关系。方法：2000年8月～2003年8月我院传染科收治住院的慢性乙型肝炎180例，采用荧光定量PCR方法检测HBV DNA血清含量，同时检测HBV血清标志物及TBil、ALT、AST。结果：血清HBeAg阳性组HBV DNA含量(106.35±1.84)显著高于HBeAg阴性组(104.73±1.88)(P<0.01)，而不同HBV DNA水平患者的TBil、ALT、AST差别无显著性(P>0.05)。结论：血清HBeAg的存在影响HBV DNA的水平变化，血清HBV DNA含量与TBil、ALT、AST水平无明显关系。
[关键词] 慢性乙型肝炎；乙型肝炎病毒核酸；定量聚合酶链反应
[中图分类号] R575 [文献标识码]A [文章编号]1673-7210(2008)04(c)-021-02
我们采用荧光定量PCR方法检测2000年8月～2003年8月我院传染科收治住院的180例不同类型慢性乙型肝炎(慢乙肝)患者血清HBV DNA基因含量，以探讨轻度、中度、重度慢乙肝患者与病毒复制水平之间的相关性。
1 对象和方法
1.1 对象
慢性乙型肝炎诊断符合2000年(西安)全国病毒性肝炎与肝病学术会议修订的诊断标准。其中，慢性乙型肝炎轻度80例，中度70例，重度30例；男性146例，女性34例，年龄5～60(平均30.7)岁，病程(6.0±5.4)年。
1.2 检测方法
HBV DNA基因含量检测采用美国Biotronics公司生产的荧光标记(AmpliSensor)HBV DNA定量试剂盒进行定量聚合酶链反应(PCR)检测，检测仪器采用美国Biotronics公司AG 9600荧光定量PCR分析仪，以<5×103 copies/ml为阴性结果。为便于统计，均以检测结果绝对值的对数值进行比较。HBV血清标志物(HBV-M)检测采用ELISA法，试剂由上海科华生物工程股份有限公司提供。血清TBil、ALT、AST测定采用美国BECKMAN COUTLER CX5PRO全自动生化分析仪测定，TBil>17.1 μmol/L、ALT>40U/L、AST>40 U/L为异常。所有检测均严格按照试剂说明书进行操作。
1.3 统计学处理
采用t检验及χ2检验。
2 结果
2.1 血清HBV DNA基因含量与HBV-M的关系
血清HBV DNA基因含量与HBV-M的关系见表1~2。
血清HBeAg阳性组HBV DNA阳性率与定量水平普遍较高，最高达8.9×1010 copy/ml，其基因含量明显高于HBeAg阴性组(t＝5.34，P<0.01)。180例患者中有29.44%(53/180)HBeAg阴性，其中部分病例HBV DNA水平还较高，最高可达9.6×108 copy/ml。
2.2 慢性乙型肝炎血清HBV DNA基因含量与肝损害程度的关系
慢性乙型肝炎血清HBV DNA基因含量与肝损害程度的关系见表3。
与重度组比较，t＝0.37，△Ρ>0.05；与重度组比较， t＝1.23，△△Ρ>0.05
2.3 血清HBV DNA基因含量与肝功能的关系
血清HBV DNA基因含量与肝功能的关系见表4。
各组间比较无明显差异，TBil组t＝0.34，1.27，1.13，Ρ>0.05；ALT组t＝0.55，1.23，1.17，Ρ>0.05；AST组t＝1.07，1.41，0.25，Ρ>0.05
3 讨论
既往报道血清HBeAg与HBV DNA定性检测呈良好相关性，而本文结果显示血清HBeAg阳性者HBV DNA基因含量明显高于HBeAg阴性者，从基因定量水平进一步证实了HBeAg确是反映乙肝病毒复制的良好指标，表明HBV DNA含量与HBeAg的存在有明显的关系，检测血清HBV DNA含量，能较好地反映HBV感染者的病毒血症水平和传染性强弱程度，与文献报道相同[1~4]。同时，本文研究表明其他各种HBV-M血清学模式均可检出不同程度的HBV复制，尽管它们的血清HBV DNA基因含量不尽相同。既往一般认为，血清HBeAg的消失或抗-HBe的出现预示HBV复制水平降低或病变恢复，而本文发现180例慢性乙型肝炎中有29.44%的病例血清HBeAg阴性，且部分的患者有高水平的HBV DNA，表明有活跃的病毒复制。对于血清HBeAg阴性、抗-HBe阳性，而HBV DNA高水平、肝功能异常的患者在临床上应引起足够的重视。
血清HBV DNA含量与慢性乙型肝炎病情轻重的关系仍不十分清楚。国内报道[1]，慢乙肝患者中随着肝损害程度的加重(依次为轻度、中度、重度)，其HBV DNA基因含量逐渐下降，认为患者病情越重病毒复制水平越低。而本文结果显示，慢性乙型肝炎轻度、中度血清HBV DNA基因含量与慢性乙型肝炎重度比较，无明显差异，未发现慢性乙型肝炎患者随肝损害程度的加重HBV DNA基因含量逐渐下降的现象。本结果与目前国内现有研究结论不同，其原因可能为血清HBV DNA基因含量与血清TBil、ALT、AST水平无相关性，即血清HBV DNA的复制水平与肝脏的炎症程度无关，提示机体对HBV的免疫应答是造成肝组织破坏和肝功能损害的主要机制，而HBV并不直接导致肝脏细胞病变。
[参考文献]
[1]蔡卫平，唐小平，陈劲峰，等.慢性乙型肝炎HBV-DNA定量检测与病原学标志和肝损害程度的关系[J].中国实用内科杂志，1998，18(3)：149-150.
[2]张复春，吴婉芬，董惠卿，等.定量聚合酶链反应检测血清中HBV DNA及其临床应用[J].中华传染病杂志，1997, 15(1)：24-27.
[3]张玲，朱江华，马韵，等.乙型肝炎病毒核酸定量检测与临床的关系[J].中华肝脏病杂志,2002, 10(1)：49-51.
[4]程钢，何蕴韶，周新宇.荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒[J].中华医学检验杂志，1999，22(3)：135-138.
(收稿日期：2007-12-05)
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