[关键词] 酶联免疫吸咐试验；问题；原因；分析

    [中图分类号]R-331 [文献标识码]B [文章编号]1673-7210(2008)05(c)-118-03

    酶联免疫吸咐试验(ELISA)具有灵敏度高、特异性好的特点，广泛应用于各种传染性疾病的筛查，如肝炎、HIV，也可应用优生优育等。优质的试剂、良好的仪器和正确的操作是保证ELISA实验结果准确、可靠的必要条件。试验中若不做好相关控制，易出现白板、花板、色弱和假阳性等现象。尤其是花板现象(空白、阴性、阳性对照以及室内质控孔结果正常，而标本孔的OD值却明显偏高)是各级临床实验室常遇到的问题。现将ELISA实验操作中的影响因素总结如下：

    1标本因素

    以辣根过氧化物酶(HRP)为标记的ELISA测定中，残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样活性，催化底物显色造成假阳性；混有红细胞的血清易沉淀或附着在聚乙烯孔内不易洗净；如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应；标本凝固不全，在临床试验中，有时为了争取时间而快速检测，常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清，使血清中仍残留部分纤维蛋白原，在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块，易造成假阳性结果；采血试管洗涤不彻底、反复使用易交叉污染；塑料试管能吸附抗原物质，样本久置在塑料管内会使样本内抗原含量下降造成假阴性。

    因此血清标本宜在新鲜时检测，禁用严重溶血的标本。一般说来，在5 d内测定的血清标本可放置于2～8℃，标本在冰箱中保存时间过长易导致血清IgG聚合 ......