影响酶联免疫吸附试验结果的常见因素及控制方法
[关键词] 酶联免疫吸附试验;影响因素;控制方法[中图分类号]R392-33 [文献标识码]C [文章编号]1673-7210(2008)08(a)-175-02
酶联免疫吸附试验(enayme liked immunosorbent assay,ELISA)是20世纪70年代发展起来的一种检测技术,因其具有敏感性高、特异性强、操作简单等优点,被广泛应用于各种抗原和抗体的测定,为辅助临床诊断与生物科研起到了积极的推动作用。但ELISA测定中影响因素较多,操作过程中每个环节都会对试验结果产生影响,出现错误的结果。现笔者对影响实验结果的常见因素及相应的控制方法分析探讨如下:
1 试剂的因素
1.1 试剂的选择
试剂的选择是保证血液检测质量的关键要素。虽然国家采用批批检定的形式对ELISA 试剂严格把关,但不同厂家的试剂在使用效果上仍存在在差异。要选购知名度相对高、具有“三证”的试剂,不要用无批号的试剂,最好选用与仪器配套的试剂。更不要使用过期的试剂和混用不同批号的试剂。
1.2 试剂的准备
在临床实验室,对试剂的准备一般不太注意,通常的做法是在实验时将试剂从冰箱中拿出来即用,而忽略了这种做法有可能影响后面时间不够的问题,其直接的后果是对一些弱阳性标本的检测出现假阴性。因此,在ELISA 测定中试剂的准备最为关键的是,将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20~30 min后,再进行测定,使试剂盒在使用前与室温平衡,这样做的目的能使反应微孔内的温度较快地达到所需的温度 ......
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