HPLC法测定尿维氨滴眼液牛磺酸含量(2)
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采用加样回收的方法。分别精密称取牛磺酸对照品20 mg
6份，置于200 ml量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取070601批样品10 ml至上述量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；再精密称取牛磺酸对照品20 mg置于100 ml量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。精密量取上述供试品溶液和对照品溶液各1 ml分别置10 ml量瓶中，依次加入0.5 mol/L碳酸氢钠溶液(pH 9.0)1 ml、1%2，4-二硝基氟苯乙腈溶液0.5 ml，摇匀，置60℃水浴中避光加热1 h，放冷至室温，加磷酸盐缓冲液(pH 7)至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液各20 μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，用实测值减去已知含量的供试品所含牛磺酸的量，并与加入量比较，计算回收率，结果平均回收率98.1%，RSD为0.81%。
2.8样品的测定
按上述方法测定了本品三批供试品中牛磺酸的含量，结果见表1。
试验结论：本品三批牛磺酸的含量测定结果均在90.0%～110.0%，与被仿制药品测定结果基本一致。
3讨论
复方尿维氨滴眼液进口质量标准中采用茚三酮反应比色法测定本品中牛磺酸的含量，该方法的重现性差，平行的两个供试品溶液测定结果相差较大，不同操作人员测定的结果相差更大，因此我们将牛磺酸的分光光度法提高为灵敏度高、选择性好的柱外衍生高效液相色谱法测定本品中牛磺酸的含量。
采用文献方法磷酸盐缓冲液(pH 7.0)-乙腈-水(70∶15∶15)为流动相[4]，360 nm为检测波长，柱温为室温，取供试品进样测定，牛磺酸保留时间约为38 min，保留时间长。柱温提升到40℃，在上述流动相体系下，牛磺酸的保留时间约为17 min，保留时间仍较长。将流动相调整为磷酸盐缓冲液(pH 7.0)-乙腈-水(70∶20∶10)，柱温为40℃，牛磺酸保留时间约为9 min，较为合适。从而确定为牛磺酸含量测定的色谱条件。
[参考文献]
[1]杨占军.人体内一种不容忽视的氨基酸-牛磺酸[J].生物学杂志,2000,17(3):33.
[2]复方尿维氨进口药品质量标准[S].标准号：JX20020035.
[3]钟广蓉.HPLC法测定盐酸精氨酸片含量[J]. 中国药品标准，2003，4(5)：36.
[4]贺晓华. HPLC法测定牛磺酸滴眼液的含量[J]. 江西中医学院学报，2002，14(3)：30.
(收稿日期：2008-03-19)
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