黄芪对体外培养心肌细胞保护作用的实验研究(1)
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[摘要] 目的：观察黄芪对体外培养的缺糖缺氧损伤心肌细胞的保护作用。方法：心肌细胞原代单层培养，观察心肌细胞形态学变化、细胞生化数据的改变以及超微结构形态学的变化。结果：药物组与药物对照组的心肌细胞内上述细胞损伤变化均得到明显恢复。结论：黄芪对体外培养的缺糖缺氧心肌细胞具有明显的保护作用。
[关键词] 黄芪；乳鼠心肌细胞；组织化学；生化检测；透射电镜
[中图分类号] R282.71[文献标识码]A [文章编号]1673-7210(2008)12(b)-011-03
Experimental study of Astragalus on protective effect of in vitro cultured myocardial cells
LI Hong-zhe1 ,JIN Xiang-zi2
(1.Yanbian Tumour Hospital, Yanji133000, China; 2.Yanbian University College of Medicine, Yanji133000, China)
[Abstract] Objective: To observe the protective effect of Astragalus on in vitro cultured myocardial cells suffering hypoxia-hypoglycemia-induced injury. Methods: Myocardial cells were performed by primary monolayer culture, then the morphological changes, biochemical data change and ultrastructural morphology change of the myocardial cells were observed. Results: The cell injury of the myocardial cells in drug group and control group of drugs significantly recovered. Conclusion: Astragalu shows a marked protective effect on in vitro cultured myocardial cells suffering hypoxia-hypoglycemia-induced injury.
[Key words] Astragalus; Rat myocardial cells; Histochemistry; Biochemistry detection; Transmission electron microscope
黄芪为豆科植物膜荚黄芪[Astragalus membranaceus(Fisch.) Bge]、蒙古黄芪[Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge.var.mongholicus(Bge).Hsiao]的干燥根，又称北芪、元芪或黄耆。豆科，多年生草本。味甘，微温，具有补气固表、托疮生肌、利水的功效，主治气血虚弱、自汗、久泻脱肛、子宫脱垂、肾炎水肿、蛋白尿、糖尿病、慢性溃疡等症。近年来临床用来治疗高血压和急慢性肾炎。被历代医家认为是补药之长。近代研究表明，黄芪具有增强免疫功能、抗衰老等作用[1，2]。
本实验从细胞生物学水平探讨了黄芪水提物对培养乳鼠心肌细胞的保护作用及其作用机制，为开发黄芪提供科学实验及科学理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
Wistar大白鼠乳鼠1～5日龄，雌、雄兼用，由延边大学医学部实验动物科提供；黄芪：由延边大学医学部植物化学教研室提供，用RPMI 1640培养基配成大剂量1 000 μg/ml，中剂量800 μg/ml，小剂量600 μg/ml，经过筛选，800 μg/ml为本实验适宜剂量浓度，过滤除菌，用于实验；人参皂苷：由延边大学医学部天然药物学教研室提取的白色粉末，纯度为85%，用RPMI 1640培养基配成300 μg/ml，过滤除菌，用于实验；RPMI 1640培养基：日本株式会社产品；超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒：南京建成生物工程研究所提供；丙二醛(MDA)试剂盒：南京建成生物工程研究所提供；胶原酶：美国Sigma化学公司产品；胰蛋白酶：美国DIFCO公司产品；四氯化碳：北京化学试剂厂产品；小牛血清：长春生物制品厂产品；CO2培养箱：美国产；超净工作台：上海净化设备厂制造；德国 Leica820型组织切片机；日本Olympus VANOX型万能显微镜；722光栅分光光度仪：厦门分析仪器厂LKB2088型超薄切片机：瑞典JEM-1200 EX型透射电镜：日本产ZK 15低温高速离心机：Sigma产品；MK-3酶标仪：芬兰雷勃集团；TD-2000型真彩病理细胞显微分析系统：北京天地百年科技有限公司。
1.2 方法
1.2.1 原代单层乳鼠心肌细胞培养方法乳鼠心肌细胞培养方法：采用姜玉顺等[3]的方法。取1～5日龄Wistar大白鼠乳鼠 ......
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